Quels facteurs peuvent affecter l'efficacité de l'utilisation de l'ADPS comme substrat chromogène ?

Dans le domaine de la détection et du diagnostic biologiques, le substrat chromogénique N-éthyl-N - (3-sulfopropyl) -3-méthoxyaniline sel de sodium (Réactif ADPSLe réactif est devenu un réactif clé dans les tests d'immunosorbent liés aux enzymes (ELISA), les analyses biochimiques et d'autres scénarios en raison de sa grande sensibilité et de sa stabilité.sa performance réelle est souvent affectée par plusieurs facteurs, entraînant des fluctuations de l'intensité des couleurs, des interférences de fond ou une faible répétabilité.

1,Qualité du substrat

Pureté chimique: la présence d'impuretés peut provoquer une coloration non spécifique ou une inhibition concurrentielle.Les intermédiaires incompletement réactifs peuvent interférer avec la liaison des enzymes aux substrats.Le choix de matières premières ADPS de haute pureté (≥ 98%) est une condition préalable à l'efficacité.

Poudre de ADPS

Uniformité des particules: l'ADPS existe généralement sous forme de poudre ou de cristal.affectant l'uniformité de concentration dans le système de réactionLes particules grossières peuvent également obstruer les microplaques ou les conduites des instruments, et une optimisation par broyage ou tamisage est nécessaire.

Stabilité de stockage: l'ADPS est sensible à la lumière, à l'humidité et à la température. L'exposition à long terme à une lumière forte peut déclencher des réactions de photolyse, produisant des produits sans couleur ou peu colorés;Cependant, les environnements à haute humidité peuvent entraîner une absorption de l'humidité et une accumulation, ce qui affecte la précision du pesage.et à basse température pour éviter la congélation et le dégel répétés.

2,Conditions de réaction

Le centre actif de l'enzyme est très sensible au pH. Si le pH du tampon dépasse cette plage, l'activité de l'enzyme peut diminuer.entraînant une intensité de couleur ADPS insuffisanteLe phosphate, le carbonate et d'autres systèmes tampons doivent être sélectionnés en fonction des caractéristiques de l'enzyme cible et calibrés avec précision à l'aide d'un pH-mètre.

Contrôle de la température: l'augmentation de la température peut accélérer le mouvement moléculaire et augmenter la fréquence de collision entre les enzymes et les substrats,mais dépasser la température optimale peut provoquer une dénaturation et une inactivation des enzymes, ce qui entraîne une diminution du signal couleur ADPS.

3,Normalisation opérationnelle

Dissolution et dilution: la poudre d'ADPS doit être dissoute dans de l'eau désionisée ou une solution tampon spécialisée, en évitant l'utilisation de solutions contenant des ions métalliques ou des solvants organiques.secouer ou remuer doucement pour éviter la formation de bulles due à un violent tremblement, ce qui peut entraîner une concentration réelle inférieure.

Sélection de la solution de terminaison: une fois la réaction de couleur terminée, la solution de terminaison doit être ajoutée immédiatement pour fixer la couleur.les produits colorants peuvent continuer à se décomposer, ce qui entraîne une diminution des valeurs d'absorbance; cependant, le pH ou l'écart de concentration de la solution terminale peuvent modifier les caractéristiques spectrales du produit,affectant la précision de la détection.

4,Facteurs d'interférence externes

Interférence de l' échantillon: l' hémoglobine, les lipides ou les métabolites du médicament dans les échantillons de sang peuvent inhiber l' activité enzymatique par adsorption ou réactions chimiques,ou se lient directement à l'ADPS pour former des complexes incolores.

Réaction croisée du réactif: S'il y a des composés ayant des structures similaires à l'ADPS dans le système de détection (comme d'autres substrats d'aniline), cela peut provoquer un développement de couleur non spécifique.

Contamination du récipient: si la microplate ou la couche colorimétrique n'est pas nettoyée à fond, elle peut retenir des enzymes ou des substrats du lot précédent, ce qui donne des résultats faussement positifs.

L'utilisation expirée de poudre d'ADPS entraîne non seulement une distorsion des données expérimentales, mais peut également entraîner des risques pour la sécurité.il est important de faire attention à la date de production et à la durée de conservationHubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. est spécialisée dans la production de nouveaux réactifs de Trinder tels que l'ADPS.N'hésitez pas à me contacter à tout moment.!

Emballage du produit

L'utilisation expirée de poudre d'ADPS entraîne non seulement une distorsion des données expérimentales, mais peut également entraîner des risques pour la sécurité.il est important de faire attention à la date de production et à la durée de conservationHubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. est spécialisée dans la production de poudres ADPS expirées.les nouveaux réactifs de TrinderSi vous avez des besoins connexes, n'hésitez pas à me contacter à tout moment!