Le rôle du trihydroxyméthyl aminométhane 77-86-1 dans les expériences de Western blot

Le Western blot est une technique classique de biologie moléculaire pour détecter des protéines spécifiques, qui implique plusieurs étapes telles que le traitement des échantillons, la séparation électrophorétique, le transfert, et la détection par anticorps.Trihydroxyméthylaminométhane, en tant qu'agent tampon essentiel, fournit un soutien crucial pour la précision et la reproductibilité des expériences en maintenant un environnement de pH stable, en optimisant la force ionique et en protégeant l'activité des protéines.

1, Environnement de pH stable, protégeant la structure des protéines

La distribution des charges, la solubilité et l'exposition des épitopes antigéniques des protéines dépendent fortement de la valeur du pH. La plage de tamponnement du trihydroxyméthylaminométhane (pH 7,0-9,0) est hautement compatible avec les conditions couramment utilisées dans les expériences de Western blot, et peut résister efficacement aux fluctuations de pH causées par l'ajout de réactifs chimiques ou les réactions électrochimiques au cours du processus expérimental.

Le trihydroxyméthylaminométhane maintient la poudre

Au cours de l'étape de lyse des échantillons, le tampon de lyse contenant du trihydroxyméthylaminométhane maintient un environnement neutre à faiblement alcalin, inhibe l'activité des protéases endogènes et empêche la dégradation de la protéine cible. Dans la préparation du gel SDS-PAGE, le triméthylolaminométhane, l'acrylamide, le persulfate d'ammonium et d'autres composants construisent conjointement un système de polymérisation stable, dont la stabilité du pH garantit que le diamètre des pores du gel est uniforme et évite la précipitation ou le changement conformationnel des protéines dû à une acidification locale. De plus, le trihydroxyméthylaminométhane dans le tampon de transfert neutralise la charge de surface de la membrane, réduit la liaison non spécifique entre la protéine et la membrane, et protège davantage l'antigénicité de la protéine.

2, Optimiser le système d'électrophorèse pour obtenir une séparation précise

La conception de la concentration de trihydroxyméthylaminométhane a été optimisée : une concentration trop faible peut entraîner une conductivité insuffisante et un courant instable ; si la concentration est trop élevée, cela peut provoquer un échauffement du gel ou une diffusion des bandes. Sa force ionique modérée peut non seulement assurer l'efficacité de l'électrophorèse, mais aussi maintenir la stabilité de la taille des pores du gel, de sorte que les protéines de différents poids moléculaires puissent être séparées clairement.

3, Favoriser l'efficacité du transfert et assurer une migration complète des protéines

Maintien de l'équilibre ionique : Le Tris (hydroxyméthyl)aminométhane, la glycine et le méthanol forment ensemble une solution de transfert. Sa stabilité du pH (généralement pH 8,3) garantit que la protéine maintient sa conformation naturelle pendant le processus de transfert, évitant la dénaturation ou la précipitation.

Optimisation de la conduite du champ électrique : Le système trihydroxyméthylaminométhane-glycine forme un gradient de champ électrique stable, entraînant les protéines à migrer vers la membrane à un rythme constant. Le méthanol peut détruire la structure du réseau du gel, tandis que le triméthylolaminométhane peut équilibrer la force ionique grâce au tamponnement, empêcher l'accumulation excessive de charges de surface de la membrane, et ainsi améliorer l'efficacité du transfert des protéines de poids moléculaire élevé.

Protéger les protéines membranaires : Les propriétés chimiques douces du trihydroxyméthylaminométhane empêchent les protéines membranaires d'être endommagées par des acides ou des bases forts, assurant l'exposition complète des épitopes antigéniques, améliorant ainsi la sensibilité et la précision de la liaison des anticorps.

Emballage du produit

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