Le mécanisme d'action du tampon biologique MES 4432-31-9 dans le kit PCR

Dans les expériences de biologie moléculaire, la technologie PCR (réaction en chaîne de la polymérase) est devenue un outil de base en raison de sa capacité à amplifier efficacement des fragments d'ADN spécifiques.Les réactions PCR sont extrêmement sensibles aux conditions environnementales, en particulier de petites fluctuations du pH, qui peuvent affecter directement l'activité de l'ADN polymérase, l'efficacité de liaison des primers et des modèles, et même conduire à une amplification non spécifique.Parmi les nombreux "héros des coulisses" qui maintiennent la stabilité des systèmes de réaction, acide 2- (N-morpholino) éthanosulfonique (Puffer MES), en tant que tampon biologique efficace, est devenu un "gardien invisible" indispensable dans les kits de PCR en raison de ses propriétés chimiques uniques.

1,Réguler le pH avec précision

Chaque étape de la réaction PCR - dénaturation, recuit et allongement - repose sur la catalyse précise de l'ADN polymérase, et l'activité de l'enzyme dépend fortement de l'environnement pH.La valeur de pKa de MES est, ce qui lui permet de présenter une excellente capacité de tamponnage dans des conditions de faible acidité. MES effectively resists pH fluctuations caused by temperature changes (such as acidic substance release during high-temperature denaturation) or reagent addition during the reaction process by dynamically balancing protonation and deprotonation, stabilisant l'environnement de réaction dans la plage de pH optimale de l'ADN polymérase.éviter une diminution de l'efficacité d'amplification ou des produits impurs causés par un déséquilibre du pH.

Poudre de MES

2,Avantages liés à la compatibilité

Comparé à d'autres agents tamponnants, la structure moléculaire du MES lui confère un avantage de compatibilité unique.mais réduit également le risque d' interaction avec d' autres composants dans les réactions de PCRPar exemple, le Mg 2+ est un cofacteur essentiel pour l'ADN polymérase, mais des quantités excessives ou insuffisantes peuvent affecter l'efficacité d'amplification.L'environnement faiblement acide du MES aide à maintenir la solubilité et la forme active du Mg 2 +En outre, la faible résistance ionique du MES réduit les interactions électrostatiques non spécifiques,réduire davantage la probabilité de dimérisation du primer ou d'amplification de déséquilibre, garantissant l'obtention de produits hautement spécifiques.

3,Adaptabilité à la température

La réaction PCR nécessite un cycle entre des températures élevées et basses, ce qui pose un sérieux défi à la stabilité du tampon.pendant la phase de haute température, sa capacité de tamponnage n'est pas affectée par la température et le pH reste stable; pendant la phase de recuit à basse température, il peut rapidement rétablir l'état d'équilibre,assurer une liaison précise des amorces et des modèlesCette caractéristique fait de MES un choix idéal pour la PCR à long fragment ou la PCR à haute fidélité - la première nécessite un temps de prolongation plus long,tandis que ce dernier repose sur l'activité élevée soutenue de l'enzyme, et l'effet tampon stable du MES fournit un soutien fiable pour les deux.

Emballage du produit

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