CAS 5625-37-6 bonnes solutions tampon SIFFLE l'acide de Piperazine-1,4-Diethanesulfonic

Le nom complet du tampon PIPES est l'acide piperazine-1,4-diéthanosulfonique, une substance qui peut maintenir le pH de la solution dans une certaine plage.Quand une certaine quantité d'acide et d'alcali est ajoutée à certaines solutions, il a pour effet d'entraver le changement de pH de la solution, ce qu'on appelle un tampontampon biologiqueUne telle solution est appelée solution tampon. PIPES est un membre important du tampon de Goods.qui ne participe ni n'interfère avec les processus biochimiques.
 
Informations de base
 

 
Application des PIPES
 
Il ne peut pas former de complexes stables avec la plupart des ions métalliques et convient pour le tamponage dans un système de solution contenant des ions métalliques.Il a été appliqué à la purification de la tubuline par chromatographie au phosphate de celluloseLes protéines de liaison GTP recombinantes purifiées ARF1 et ARF2 ont été purifiées par filtration au gel et utilisées comme tampon pour cristalliser la cétonzyme de E. coli.parce que les PIPES peuvent former des radicaux libres, il n'est pas adapté au système redox.Une faible concentration de solution tampon PIPES doit être utilisée dans la chromatographie par échange de cations, car PIPES a une résistance ionique relativement élevée et sa valeur pKa dépend de la concentration..
 

La réserve PIPES
 
Avantages du PIPES
 
La pureté (> 99%) est soluble dans l'eau, le procédé est stable et l'apparence du produit peut être garantie pour être une poudre cristalline blanche pure.
 
L'acide diéthanosulfonique piperazine PIPES possède une variété de systèmes tampons,dont la solution tampon Transformation Buffer (également appelée solution TB) peut être utilisée pour préparer des cellules compétentes à haut rendement.
Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellCertaines bactéries sont naturellement compétentes, comme Bacillus subtilis, et certaines sont artificiellement compétentes, comme Escherichia coli.Le traitement des cellules réceptrices par une méthode spéciale peut modifier la perméabilité de la membrane cellulaire., ce qui en fait une cellule compétente qui permet aux molécules porteuses d'ADN étranger de passer.
Préparation du tampon de transformation:
 

La transformation de cellules bactériennes compétentes utilise la méthode du chlorure de calcium.37 degrés pendant la nuit jusqu'à ce qu'une seule colonie grandisse.Choisissez une colonie d'un diamètre de 1 à 3 mm pour inoculer le milieu SOB dans un flacon Erlenmeyer de 250 ml ou 80 ml. Incubez à 18 degrés à 150-250 tours par minute pendant 19 à 50 heures.Arrêtez la culture lorsque la dose de 600 est d' environ 0..4 à 0.8, refroidir dans de l'eau glacée à 4 degrés pendant 10 minutes, centrifuger à 300 tr/min pendant 15 minutes, récupérer les bactéries après avoir retiré le surnaturant, suspendre dans 1/3 de volume de solution glacée de tuberculose,et centrifugez à nouveau pendant 10 minutes pour récupérer les bactériesSuspendre avec 1/12,5 volume de TB, ajouter du DMSO avec une concentration finale de 7%, puis refroidir pendant 10 minutes dans des aliquotes de 0,1-1 ml, et conserver directement dans de l'azote liquide ou à -80°C.
 

Emballage du produit
Dans la solution de tuberculose d' Escherichia coli en suspension, les principaux composants comprennent le tampon PIPES et le chlorure de calcium pour transformer les cellules en cellules compétentes.Il convient de noter que cette méthode est adaptée pour E. coli qui ne contiennent pas de plasmides, et ne convient pas aux grands plasmides.la DSO600 optimale de différentes souches bactériennes est également différente, et doit être ajustée en fonction de différentes expériences.
Il existe de nombreuses méthodes pour préparer des cellules compétentes pour la tuberculose, et l'efficacité des différentes méthodes peut être différente, et les souches ou types de cellules applicables peuvent également être différents.La réserve PIPESLe produit produit par Desheng est un réactif en poudre, et des solutions compétentes pour la tuberculose peuvent être préparées en fonction des différents besoins.