Cyclohexylamine 1135-40-6 de CAS PAC Propanesulfonic acide dans l'expérience

La cyclohexylamine PAC acide propanesulfonic est une matière première biochimique utilisée généralement. Elle peut être employée comme adjuvant de salaison pour des flux, des déshydratants, et des isocyanates à base d'eau dans les revêtements. Dans l'industrie biochimique, elle est habituellement employée comme tampon biologique. Selon son contenu de pureté et d'impureté, l'industrie d'application est également différente.

Du point de vue de la structure moléculaire, PAC est un acide sulfamique n-substitué de cyclohexane avec un poids moléculaire de 221,32 et amphotère. C'est un tampon biologique très bon avec une gamme de tampon de pH de 9.7-11.1. Il est habituellement employé pour des expériences de WB. Tampon pour la membrane de transfert de la protéine PVDF ou la membrane de transfert de la nitrocellulose OR.

Le WB représente l'expérience immunoblotting de protéine occidentale de tache. Le principe est de colorer des cellules ou des échantillons biologiques traités par l'électrophorèse de gel avec des anticorps spécifiques, et obtient l'expression des protéines spécifiques dans les cellules analysées ou des tissus en analysant la position et la profondeur de la coloration. L'information. Les notes expérimentales sont comme suit :

Réactif de PAC

1. Électrophorèse de SDS-PAGE : semblable à la méthode acide nucléique d'hybridation, sauf que détecté est la protéine, la sonde est l'anticorps, et à l'anticorps secondaire coloré est marqué. D'une façon générale, le système de solution tampon de Tri glycérine ou de Tris-Tricine est employé pour les protéines de faible poids moléculaire, et le système de tampon de PAC est meilleur pour des protéines de poids. La glycine dans le tampon affectera l'ordonnancement, ainsi le tampon de transfert utilisé pour ordonnancer est méthanol de 10mM/1CAPS10%. La concentration du méthanol dans le tampon electroimprinting de PAC est 0-20%. Généralement, un tampon avec une concentration élevée en méthanol exerce un bon effet de transfert sur les protéines de faible poids moléculaire, alors qu'un tampon avec une basse concentration en méthanol ou même aucun méthanol est bon pour des protéines de poids. Transfert.

2. Quand la membrane de PVDF est traitée, imbibez-la en méthanol pendant quelques secondes, et puis mettez-la dans le tampon electroimprinting de PAC. Les opérations complémentaires doivent empêcher la membrane de se dessécher. Si la membrane de PVDF devient sèche, répétez les étapes précédentes. Le gel d'électrophorèse doit également être imbibé dans le tampon de PAC pendant 5-10 minutes. Quelques protéines fortement fondamentales n'ont pas besoin de cette étape.

3. Les conditions de transfert sont habituellement la tension 50V constante, l'intensité 100-170mA actuelle, et le transfert d'electroimprint à la température ambiante. Les bulles entre le gel et la membrane de PVDF doivent être enlevées. Pour des protéines avec un poids moléculaire plus élevé, prêtez l'attention pour prolonger le temps de transfert.

4. Avant la teinture, la membrane de PVDF doit être sortie et rincée avec de l'eau désionisé, imbibé en méthanol, puis a teint avec 0,1% bleus brillants de Coomassie pendant 30-50 secondes, décolorés avec du méthanol de 50%, lavés avec de l'eau désionisé et secs.

Ce qui précède présente quelques sujets ayant besoin d'attention dans la protéine imprimant l'expérience. En plus de l'expérience elle-même, la technologie de Desheng vous rappelle que pour la sécurité et santé, portez svp les vêtements de laboratoire et portez les gants jetables pour l'opération. Le tampon de électro-impression de PAC est recommandé pour être produit par Desheng la configuration de l'acide propanesulfonic de cyclohexylamine de haute qualité.