Principe de réaction catalytique et de détection de la glutamate déshydrogénase GLDH

Glutamate déshydrogénase (GLDH) ou GDH est une enzyme liée au métabolisme des acides aminés in vivo, présente dans les tissus du foie, du cerveau et des reins, et couramment utilisée comme indicateur de détection des maladies du foie. La GLDH peut catalyser la déshydrogénation de l'acide L-glutamique pour produire de l'acide alpha-cétoglutarique, qui entre dans le cycle de l'acide tricarboxylique.

L'acide glutamique est un acide aminé acide avec deux groupes carboxyle dans sa molécule. Son nom chimique est alpha-aminoglutarate, et il joue un rôle important dans le métabolisme des protéines dans les organismes. Il participe à de nombreuses réactions chimiques importantes chez les animaux, les plantes et les micro-organismes. L'acide glutamique (acide 2-aminoglutarique) a trois isomères, l'isomère gauche, l'isomère droit et l'isomère racémique. L'acide L-glutamique est son glutamate gauche, et la glutamate déshydrogénase capable de déshydrogénation (désamination oxydative) est l'acide L-glutamique.

Glutamate déshydrogénase

La glutamate déshydrogénase est principalement présente dans les mitochondries des cellules du foie, du cœur et des reins, avec de petites quantités trouvées dans les mitochondries du cerveau, des muscles squelettiques et des globules blancs. En plus de catalyser la réaction réversible de la déshydrogénation de l'acide L-glutamique, elle a également la fonction de catalyser d'autres acides aminés, tels que la catalyse de l'oxydation de la L-valine, de l'acide L-2-aminobutyrique et de la désamination de la L-leucine.

Principe de la détection de la glutamate déshydrogénase GDH :

Le principe de détection de l'activité de la glutamate déshydrogénase GLDH, équation de réaction du produit fini : α - cétoglutarate α - cétoglutarate+NH3+NADH+H+est catalysé par la glutamate déshydrogénase pour générer du glutamate GLDH+NAD++H2O NADH. Réactif : A Tampon Tris HCl 0,1 M, pH 8,3 B Solution de NH4Cl 1,5 M C Solution d'acide α - cétoglutarique 0,225 M (pH 7,0-9,0) D Solution de NADH 7,5 mM E Diluant enzymatique : Tampon Tris HCl 0,1 M, pH 8,3. La consommation de NADH peut être détectée en mesurant l'absorption de la lumière à 340 nm. Temps de mesure : 180 s Temps de retard : 60 s Temps d'intégration : 120 s Coefficient/facteur : 6,776 Température de mesure : 30 ± 1 ℃ 3.2 Préparation de l'échantillon Si l'échantillon à tester est solide, il peut être dissous dans un rapport de 10 mg d'échantillon/1000 ul d'eau ultrapure. Dissoudre et placer à 2-8 degrés Celsius.

La glutamate déshydrogénase est une enzyme très importante dans le foie, impliquée dans le métabolisme du glutamate, de l'alpha-cétoglutarate et d'autres acides aminés. Par conséquent, la détection de la teneur en GDH sérique est un indicateur important de la santé de l'organisme. La préparation enzymatique de GDH fournie par Desheng est la matière première du kit de réactif, principalement utilisée pour la détection biochimique et les expériences de recherche connexes.

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