Quel tampon Tris ou EPPS convient à la méthode de phénol de foline pour détecter la protéine ?

La chaîne de tampon de Tris est environ 6-8, qui convient à la plupart des expériences biochimiques, particulièrement dans les expériences relatives de recherches de la protéine et de l'acide nucléique ; EPPS est également approprié à la protéine et à l'acide nucléique. L'expérience de recherches est plus chère que Tris, ainsi quel est-ce que convient à la méthode de phénol de foline pour détecter l'expérience de protéine ?

La méthode de réactif de Foline-phénol est une méthode de base utilisée généralement pour déterminer la concentration en protéine et a été très utilisée dans le domaine de la biochimie. Dans des applications pratiques, EPPS (HEPPS) est habituellement employé comme tampon pour que la méthode de phénol de foline détecte la teneur en protéines, plutôt qu'utilisant le tampon de Tris.

Le tampon Tris et EPPS sont utilisés pour la détection de teneur en protéines

Le principe de coloration de la méthode de phénol de foline pour la détermination de la teneur en protéines est identique que celui de la méthode de biuret (mais d'EPPS ne peut pas être employé pour le biuret/détection de biuret). La différence est que le deuxième réactif, le réactif de Foline-phénol, est ajouté. Afin d'augmenter la quantité de couleur, améliorant de ce fait la sensibilité de détecter des protéines. L'avantage de la méthode de phénol de foline pour détecter la teneur en protéines est qu'il a la sensibilité élevée et est beaucoup plus sensible que la méthode de biuret. Naturellement, il a également quelques inconvénients que cela prend un bon moment, la courbe standard n'est pas droit, la spécificité est pauvre, et il y a davantage les substances parasites.

N'importe quel groupe qui interfère la réaction de biuret, telle que - CO-NH2, - le tampon de CH2-NH2, de CS-NH2 et de Tris, le sucrose, le sulfate d'ammonium, et les composés sulfhydryliques, peut interférer la réaction de Foline-phénol et affecter ce dernier beaucoup plus grands. En outre, les phénols et l'acide citrique interfèrent également cette réaction.

le réactif de Foline-phénol se compose de deux réactifs. Le réactif un se compose du carbonate de sodium, de l'hydroxyde de sodium, du sulfate de cuivre et du tartrate de sodium de potassium. Le lien de peptide dans la protéine réagit avec la solution de tartrate d'en cuivre de sodium de potassium dans des conditions alcalines pour former un complexe pourpre-rouge. Le deuxième réactif se compose d'acide phosphomolybdique, acide phosphotungstique, acide sulfurique, brome et ainsi de suite. Dans des conditions alcalines, ce réactif est facilement réduit par le groupe phénolique de tyrosine dans la protéine pour donner une réaction bleue, et son intensité de la couleur est proportionnelle à la teneur en protéines. Cette méthode est également appropriée à déterminer le contenu de la tyrosine et du tryptophane. La gamme de mesure de cette méthode est la protéine 25-250μg.

En résumé, l'avantage de la méthode de phénol de foline pour déterminer la teneur en protéines est sensibilité élevée, mais l'inconvénient est que cela prend un bon moment et s'y mêle. Tris peut également causer l'interférence. Le tampon d'EPPS devrait être utilisé. Desheng produit chacun des deux tampons, pour ne pas indiquer lesquels est meilleur, mais pour convenir pour différentes études expérimentales.