Photométrie des enzymes TOPS pour le substrat colorimétrique: détermination précise des acides gras libres (AFA)

Les acides gras libres (AFE), en tant que produit intermédiaire principal du métabolisme énergétique humain, sont étroitement liés au diabète, à l'obésité, aux maladies cardiovasculaires et au syndrome métabolique.La mesure précise et rapide de la concentration de FFA n'est pas seulement un indicateur clé pour le diagnostic cliniqueLa méthode de dépistage de l'hypothyroïdie est utilisée dans de nombreux pays, mais elle est également un outil important pour le développement de médicaments et l'évaluation nutritionnelle.Les TOPSLa méthode photométrique enzymatique est progressivement devenue la technologie dominante pour la détermination de l'AFE en raison de sa grande sensibilité, de sa forte stabilité et de son fonctionnement pratique.

Principe technique: combinaison parfaite de réaction enzymatique et de réaction colorimétrique

Le noyau de la photométrie enzymatique TOPS est de relier le processus d'oxydation enzymatique de FFA à la réaction colorimétrique et de l'analyser quantitativement par la méthode colorimétrique.le processus de détection est divisé en deux étapes:

1. étape d'oxydation enzymatique: l'AFC dans l'échantillon est catalysé par l'acétyl CoA synthase pour se lier à l'ATP et à la CoA pour générer de l'acétyl CoA, tout en libérant du pyrophosphate;L'acétyl CoA oxydase oxyde davantage l'acétyl CoA pour produire du peroxyde d'hydrogène (H 2 O 2).

2- étape de réaction de couleur: sous catalyse de la peroxidase (HRP),H 2 O 2 subit une réaction redox avec le substrat couleur TOPS et la 4-aminoantipyrine (4-AAP) pour générer des composés imines rouges stablesLa profondeur de couleur du composé est liée de façon linéaire à la concentration de FFA.et la teneur en FFA peut être calculée avec précision en mesurant l'absorbance avec un spectrophotomètre (généralement à une longueur d'onde de 550-570 nm).

Avantages techniques: sensibilité, stabilité et facilité d'utilisation

Comparée aux méthodes traditionnelles, la photométrie des enzymes TOPS présente des avantages significatifs:

1• Haute sensibilité: le TOPS a une absorption molaire beaucoup plus élevée que les réactifs de couleur traditionnels (tels que les réactifs de cuivre) et peut détecter des FFA aussi bas que μ mol/L.Il convient particulièrement à l'analyse précise d'échantillons à faible concentration tels que le sérum..

2. Forte stabilité: le TOPS a des propriétés chimiques stables et n'est pas facilement affecté par la température, les fluctuations du pH ou les interférences de la matrice d'échantillonnage,assurer la répétabilité et la fiabilité des résultats de détectionEn outre, le format du kit (système à double réactif) simplifie davantage le processus d'opération et réduit les erreurs humaines.

3. Opération pratique: aucune étape de pré-traitement complexe (telle que l'extraction organique ou la dérivatisation) n'est requise.et la détection peut être complétée en 10-15 minutes, ce qui réduit considérablement le temps de détection.

4- Haute rentabilité: par rapport à la chromatographie gazeuse ou à la chromatographie liquide, la photométrie des enzymes TOPS ne nécessite pas d'instruments et d'équipements coûteux, a une faible consommation de réactif,et convient à une promotion à grande échelle dans les laboratoires cliniques.

Application clinique: du diagnostic des maladies à la gestion de la santé

Les scénarios d'application de la photométrie des enzymes TOPS sont vastes, couvrant plusieurs domaines tels que le diagnostic clinique, la recherche métabolique et le développement de médicaments

1Évaluation du risque de maladies cardiovasculaires: l' augmentation du taux d' FFA est un facteur de risque indépendant de l' athérosclérose et de l' ischémie du myocarde.La détection régulière peut aider au diagnostic précoce et à la surveillance du pronostic.

2. Gestion des maladies métaboliques: les patients diabétiques sont souvent accompagnés d' un trouble métabolique de l' FFA.La surveillance dynamique de la concentration en FFA peut optimiser les programmes de traitement à l'insuline et contrôler les fluctuations de la glycémie..

Conclusion: La méthode de photométrie enzymatique TOPS, basée sur des principes scientifiques innovants et une mise en œuvre technique pratique, fournit une solution efficace et précise pour la détection des FFA.Du diagnostic clinique à la gestion de la santé, de la recherche fondamentale au développement de médicaments, cette technologie est en constante évolution dans le domaine de la médecine métabolique et protège la santé humaine.

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