Le rôle important des médias de transport d'échantillon d'ARN de sel de guanidine dans la détection d'acide nucléique

La nouvelle crainte causée coronaire de pneumonie en 2020, non seulement réclamée les vies de beaucoup de personnes, mais également abrupte le pas de la vie. En raison d'une épidémie, le PIB de la Chine est descendu, et l'économie est directement revenue il y a à une décennie. Quoique l'épidémie soit relativement dessous contrôle, les experts ne peuvent pas garantir qu'il a été complètement commandé, et il fera même un retour. L'essai d'acide nucléique est actuellement la méthode principale de diagnostic et de contrôle de la nouvelle pneumonie coronaire. Cependant, l'acide nucléique examinant également rencontre des problèmes sans fin. Par exemple, les résultats d'essai sont un grand nombre de faux négatifs. Pour ce problème, le milieu de transport d'échantillon d'ARN fournit la grande aide.

Médias de transport de virus (inactivés et non-inactivés)

Avant d'extraire l'acide nucléique témoin, le milieu commun de transport d'échantillon doit mettre l'échantillon dans un environnement au-dessus de 56°C pour inactiver le virus. Ce processus d'inactivation protège assurément le personnel dans l'inspection contre l'exposition de virus, mais il détruit également l'intégrité de l'acide nucléique viral, causant quelques échantillons de ne pas être détectés normalement, qui est l'une des raisons du taux élevé de faux négatif.

Le chauffage à hautes températures augmentera la dégradation de l'ARN et réduira la quantité de détection d'échantillon. Utilisant le transport d'ARN les médias peuvent effectivement empêcher la dégradation de l'ARN. Concernant la conservation après que l'échantillon de virus soit rassemblé, par exemple, après que l'écouvillon pharyngeal soit prélevé, l'échantillon est empaqueté et puis mis dans le tube d'échantillonnage. Non tous les tubes d'échantillonnage stériles peuvent être utilisés pour stocker des virus, au moins un milieu de transport d'échantillon d'ARN est exigés pour sauver. Pour le stockage de virus, des médias non-inactivés de transport de virus sont généralement employés.

Les composants des médias non-inactivés de transport de virus sont : Écheveaux base liquide, gentamicine, antibiotiques fongiques, tampon et acides aminés de BSA (v), cryoprotectant, biologiques. La combinaison des antibiotiques multiples a des effets antibactériens et antifongiques. L'albumine (BSA) de sérum de boeuf comme stabilisateur de protéine peut former un film protecteur dans la coquille de protéine de virus, la rendant difficile de décomposer et assurer l'intégrité du virus. L'environnement neutre construit par des aides de tampon d'écheveaux augmentent la période de survie du virus et la stabilité de l'infection. Son avantage est qu'il peut effectivement préserver l'activité du virus. Il est commode pour l'isolement et la culture suivants du virus, mais les lieux sont qu'ils doivent être stockés à une basse température.

L'ARN est facilement dégradé, et la RNase est simplement l'ennemi naturel de l'extraction d'ARN. La RNase a un large éventail de sources et peut inclure de divers organismes en nature. Par conséquent, il est difficile de garantir que la RNase ne sera pas mélangée dans les échantillons que vous vous rassemblez. La RNase dégrade également l'ARN à la température ambiante, ainsi nous devons stocker des échantillons à 4° (à court terme) ou à -70° (terme long d'un milieu). Si nous voulons stocker le virus d'ARN pendant longtemps, nous devons employer l'azote liquide. Dans de nombreux cas, l'expérience d'extraction exige le lysis rapide de l'échantillon après récupération, et même l'opération sur la boîte de glace réduisent le taux de dégradation d'ARN. S'il y a peu d'échantillons viraux d'ARN rassemblés en échantillon original, il deviendra moins après une période de dégradation de RNase. Après que la température soit chauffée à 56°, l'activité de l'enzyme augmente. À 92°, l'enzyme ne sera pas dénaturée, mais l'efficacité sera encore améliorée. Alors le phénomène de dégradation sera plus sérieux.

Y a-t-il une manière de sauver le virus sans être décomposée par la RNase ? La réponse est le milieu de transport de virus d'ARN de sel de guanidine, qui est le milieu de transport d'inactivation de virus.

Les sels de guanidine incluent généralement le chlorhydrate de guanidine, nitrate de guanidine, le cyanoguanidine et semblable, qui peut effectivement dénaturer des protéines. La RNase est également une protéase qui sera dénaturée et perd son rôle original. La coquille de virus est également faite de protéine, ainsi le sel de guanidine peut également inactiver le virus. Le processus du chauffage 56° peut être omis.

Les médias de transport d'inactivation de virus peuvent inactiver des virus et réduire l'infectiosité des échantillons de virus, alors que l'élimination du processus de la chauffage à hautes températures améliore considérablement l'exactitude de la détection d'acide nucléique. Depuis l'épidémie, Desheng avait travaillé dur pour développer des médias de transport de virus pour faciliter la détection d'acide nucléique. Des médias de transport de virus de Desheng sont inactivés et non-inactivés, et les écouvillons nasaux et pharyngeal sont également disponibles.