HEPES est un genre de tampon amphotère d'ions d'hydrogène avec la bonne capacité de tampon et la longue heure de maintenir la constante de pH. Il est très utilisé dans le tampon de réaction d'acide nucléique, le tampon d'hybridation et le milieu de culture cellulaire. Selon ses caractéristiques, il y a quelques différences dans la configuration du tampon dans différentes expériences.
Propriétés physiques et chimiques de HEPES
[4 (2-Hydroxyethyl) - 1-piperazinyl] acide 2 ethanesulfonic
No. de CAS : 7365-45-9
Formule moléculaire : C8H18N2O4S
Poids moléculaire : 238,3
Chaîne de tampon : 6.8-8.2
Structure moléculaire :
Liqueur mère de HEPES (stock régulateur) : préparez directement la solution de 0.5-1m HEPES et la solution de NaOH, commandez le rapport de mélange des deux pour ajuster le pH, et puis employez l'eau distillée ou l'eau ultra pure pour fixer le volume. S'il y a lieu, le NaOH peut être remplacé par le KOH.
Solution saline de tampon de HEPES : ajoutez un peu de chlorure de sodium et de phosphate disodique d'hydrogène dans la solution de HEPES, puis ajoutez le soluté de NaOH, ajustez le pH, ajoutez l'eau distillée pour le volume constant, et la stockez à la basse température.
Milieu de culture cellulaire de HEPES : ajoutez un peu de chlorure de sodium, de chlorure de potassium, de phosphate disodique d'hydrogène, de dextrane, d'etc. dans le soluté de HEPES, puis ajustez le pH avec la solution de NaOH, et le stockez finalement à un volume constant et à une basse température. Dans des expériences d'adhérence cellulaire, des ions de calcium et de magnésium sont habituellement ajoutés au milieu de culture de HEPES pour protéger le cadherin des cellules et pour ne pas affecter la formation de l'agrégation de cellules.
Solution d'ha : Le milieu de culture cellulaire de HEPES-BSA, qui est l'un des composants du milieu de culture cellulaire, ne contient pas des ions de calcium et de magnésium, et contient quelques autres ions de sel. Après le traitement des bactéries de filtration, il est en grande partie approprié au nettoyage et à la culture dans la culture primaire des cellules de tissu.
Ce qui précède est la différence d'application du tampon de HEPES développée et produite par Desheng dans différentes expériences. En outre, la solution non inactivée de conservation de virus developpée récemment par la société contient également le tampon de HEPES. Puisqu'elle n'exerce aucun effet toxique sur des cellules, elle maintient non seulement le pH, mais également augmente la période de survie in vitro des cellules hôtes de virus après échantillonnage, maintient l'intégrité de l'acide nucléique et de la protéine de virus dans la plus large mesure possible, et améliore l'exactitude de détection.
