L'HEPES (4- ((2-hydroxyéthyl)-1-acide piperazine-thanosulfonique) est un tampon zwitterionique, numéro CAS 7365-45-9,ce tampon est généralement utilisé dans les expériences biochimiques pour régler le pH du système de réactionIl n'est pas toxique pour les cellules et maintient le pH pendant une longue période.
Puffer HEPESest un tampon amphotérique non ionique avec une bonne capacité de tampon dans la gamme de pH 7,2-7.4Leur caractéristique principale est de maintenir une valeur de pH relativement stable dans le milieu de culture ou l'observation cellulaire.les bouchons des flasques de culture cellulaire doivent être serrés fermement pour éviter que le carbonate requis ne s'échappe dans l'air..
La façon de préparer le tampon HEPES.
Le tampon de l'hépès peut être ajouté directement dans le milieu de culture préparé avec la concentration requise, suivi d'une stérilisation par filtre. Ajouter 2,38 grammes de poudre d'hépès à chaque 1000 ml de solution de culture,régler le pH à 7.2 avec 1NNaOH après dissolution, filtration et stérilisation avant application, à ce moment, la concentration de HEPES est de 10 mmol/L.
En ajoutant 99 ml de solvant de culture cellulaire dans 1 ml de solution de base, la concentration de HEPES est également de 10 mol/L. Voici comment préparer une solution de base de HEPES à 1 mol/L. Tout d'abord, dissoudre 23.8 g de HEPES dans 90 ml d'eau à double distillation;deuxièmement,ajuster le pH à 7,5 à 8,0 avec 1N NaOH;troisième,faire jusqu'à 100 ml avec un titrant d'eau;depuis,filtrer et stériliser avant d'être emballé dans une bouteille de 2 ml;enfin stocker à 4°C ou -20°C.
Avec une résistance à haute température et un point de fusion jusqu'à 200°C, la poudre HEPES ne sera pas dégradée par autoclave.si la solution aqueuse HEPES est exposée à la lumière ambiante pendant trois heures, le peroxyde d'hydrogène toxique (H2O2) sera généré.La première est que la solution aqueuse de HEPES doit être maintenue à l'écart de la lumière afin de ne pas affecter les résultats expérimentaux.Après avoir été configuré comme solvant, il doit être conservé à 4 °C et utilisé dans un court laps de temps pour de meilleurs résultats.Une autre est généralement placée dans une pièce sèche et ne peut pas être exposée directement au soleil pendant une longue période..
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