Similitudes et différences entre Tris et Tris-HCL et Tris-EDTA

Tris: aminométhane de triméthylol

Le trisméthylaminométhane (Tris) est un composé organique de formule (HOCH 2) 3CNH 2.Base de Trisest utilisé pour préparer des tampons dans les expériences de biochimie et de biologie moléculaire.qui peut se condenser avec des aldéhydes lorsqu'il contient des groupes aminés. Caractéristiques de tamponnage La Tris est une base faible. À température ambiante (25°C), son pKa est de 8.1Selon la théorie du tamponage, la plage de tamponage efficace du tampon Tris est comprise entre pH 7,0 et 9.2.

Le pH de la solution aqueuse de base Tris est d'environ 10.5Généralement, l'acide chlorhydrique est ajouté pour ajuster la valeur du pH à la valeur désirée, puis la solution tampon avec cette valeur de pH peut être obtenue.l'influence de la température sur le pKa de Tris doit être contrôlée.

Comme le tampon Tris est une solution alcaline faible, l'ADN sera déprotoné dans une telle solution, améliorant ainsi sa solubilité.On ajoute souvent de l'EDTA au tampon de l'acide chlorhydrique de Tris pour en faire un tampon TE.. le tampon TE est utilisé pour la stabilisation et le stockage de l'ADN. Si la solution acide ajustée au pH est remplacée par de l'acide acétique, on obtient un " tampon TAE " (Tris/acétate/EDTA),et si elle est remplacée par de l'acide boriqueCes deux tampons sont utilisés dans les expériences d'électrophorèse des acides nucléiques.

1 M Tris-HCl (pH7.)4, 7.6, 8.0)

Concentration du composant 1M Tris-HCl

Volume de préparation 1L

Méthode de préparation:

1On pèse 121,1 grammes de Tris dans un verre de 1 litre.

2. Ajouter environ 800 ml d'eau désionisée et remuer pour dissoudre.

3. Ajouter la quantité de HCl concentré indiquée dans le tableau ci-dessous pour ajuster la valeur de pH requise.

pH HCl concentré

7.4 environ 70 ml

7.6 environ 60 ml

8.0 environ 42 ml

4Apportez la solution à 1 L.

5Après stérilisation à haute température et haute pression, conserver à température ambiante.

Remarque: Laisser refroidir la solution à température ambiante avant de régler la valeur du pH, car la valeur du pH de la solution Tris varie considérablement avec la température.Lorsque la température augmente de 1°C, la valeur du pH de la solution diminue d'environ 0,03 unité.

1.5 M Tris-HCl (pH8.8)

Concentration du composant 1,5 M Tris-HCl

Volume de préparation 1L

Méthode de préparation

1Il pèse 181,7 g de Tris dans un verre de 1 litre.

2. Ajouter environ 800 ml d'eau désionisée et remuer pour dissoudre.

3Ajustez le pH à 8,8 avec du HCl concentré.

4Apportez la solution à 1 L.

5Après stérilisation à haute température et haute pression, conserver à température ambiante.

Remarque: la solution doit être refroidie à température ambiante avant de régler la valeur du pH, car la valeur du pH de la solution de Tris varie considérablement avec la température,

Pour chaque augmentation de température de 1°C, le pH de la solution diminue d'environ 0,03 unité.

Les avantages du tampon Tris-HCl sont les suivants:

Comme la base de Tris est plus alcaline, vous pouvez utiliser ce système tampon pour préparer une solution tampon avec une large gamme de pH allant de l'acide à l'alcalinité.

2 Peu d'interférence avec les processus biochimiques, aucune précipitation avec des ions calcium, magnésium et métaux lourds.

Les inconvénients sont les suivants:

1 La valeur du pH de la solution tampon est fortement affectée par la concentration de la solution, la solution tampon est diluée dix fois et la variation de la valeur du pH est supérieure à 0.1;

2L'effet de température est important et la variation de température a une grande influence sur la valeur du pH de la solution tampon, à savoir:031, par exemple: le pH de la solution tampon à 4°C=8.4, alors la valeur du pH à 37°C= 7.4, il doit donc être préparé à la température d'utilisation, le tampon Tris-HCl préparé à température ambiante ne peut pas être utilisé à 0 °C ~ 4 °C.

3 Il est facile d'absorber le CO2 dans l'air, le tampon préparé doit donc être bien scellé.

Cette solution tampon interfère avec certaines électrodes de pH, utilisez donc une électrode compatible avec la solution Tris.

La solution de Tris peut absorber le dioxyde de carbone de l'air, faites attention au scellement pendant le stockage, si vous avez besoin de stérilité, vous pouvez ajouter de l'azide de sodium.

TE est le tampon Tris-EDTA (10mM Tris, 1mM EDTA, pH7,4 pH7,6 pH8,0).

Réactifs de biologie moléculaire couramment utilisés pour la dissolution de l'ADN.

Préparer le tampon 10×TE (pH7).4, 7.6, 8.0)

Concentration du composant: 100 mM de Tris-HCl, 10 mM d'EDTA

Volume de préparation: 1L

Méthode de préparation:

1. Mesurer la solution suivante et la placer dans un bol de 1 litre.

1M Tris-HCl tampon (pH7).4, 7.6, 8,0) 100 ml

500 mM EDTA (pH8.0) 20 ml

2. Ajouter environ 800 ml d'eau désionisée au bol et mélanger uniformément.

3Après réglage du volume à 1L, stériliser à haute température et haute pression.

4Conserver à température ambiante.