Effet protecteur d'aminomethane (hydroxyméthylique) de tris sur des coupures de brin d'ADN

Les dommages causés par les radiations à l'ADN se produisent généralement de deux façons: directe et indirecte.L'effet indirect implique la radiolyse de la solution autour de l'ADN et l'interaction ultérieure entre l'ADN et les produits de radiolyse..

On estime que 80% des effets létaux d'un rayonnement LET élevé sont causés par des effets directs.qui est également utile pour clarifier le mécanisme moléculaire de l'effet biologique relatif élevé du rayonnement LET élevé.

Poudre de base TRIS

Dans l'étude des dommages à l'ADN causés par les rayonnements ionisants, il est évidemment utile d'obtenir des résultats expérimentaux plus précis et fiables pour sélectionner le système de dissolution de l'ADN approprié.Le système de dissolution le plus courant de l'ADN est le tampon, et ses principaux composants sont 10 mmol/ L de tris (triméthylaminométhane) et 1 mmol/ L d' EDTA (acide tétraacétique d' éthylénodiamine) à pH 8.0Regardons les principes principaux de l'étude.

ADN plasmide PUC19 dissous dans de l'eau pure, 10 mmol/lBase de Tris, 1 mmol / L led RA et te tampon a été irradié par un faisceau d' ions de carbone de 100 keV / p.m. (énergie initiale 290 MeV / U).La proportion de différentes molécules d'ADN dans différentes solutions a été analysée par électrophorèse au gel d'agarose, et le nombre moyen de ruptures de chaîne unique (SSB) et de ruptures de chaîne double (DSB) dans chaque plasmide a été calculé à des doses différentes.

Il a été constaté que Tris pouvait protéger significativement l' ADN plasmide de l' irradiation par des ions lourds de carbone en inhibant la production de SSB et de DSB,tandis que l' EDTA pourrait améliorer la production de SSB et inhiber la formation de DSB.

Electrophorétogramme de la molécule d'ADN pUC19 dans une solution et une dose d'irradiation différentes

Il ressort de la figure ci-dessus qu'avec l'augmentation de la dose d'irradiation, le pourcentage d'ADN superenroulé dans l'ADN total diminue.la teneur en ADN superenroulé dans le Tris et le tampon te a diminué lentementLorsque la dose a été augmentée à 150Gy, la teneur en ADN superenroulé dans Tris et le tampon était toujours supérieure à 80%, mais la teneur en ADN superenroulé dans l'EDTA et l'eau était inférieure à 60%.Les résultats ont montré que l'ADN en tri produisait moins de ruptures de brins que dans l'eau et l'EDTA..

Une série de résultats montre que Tris a un effet protecteur évident sur les dommages de rupture des chaînes d'ADN induits par l'irradiation par ions de carbone de 100 keV/L ~ m.l'ADN en super-enroulement existait tout le temps et présentait une protection évidente par rapport à l'eau pure et à la solution EDTA.