Effet protecteur d'aminomethane (hydroxyméthylique) de tris sur des coupures de brin d'ADN

Les dommages causés par les radiations d'ADN se produisent habituellement de deux manières : direct et indirect. Dans l'action directe, ADN elle-même est ionisée. L'effet indirect implique la radiolyse de la solution autour de l'ADN et l'interaction suivante entre l'ADN et les produits de radiolyse.

On l'estime que 80% des effets mortels de haut LAISSENT le rayonnement sont provoqués par des effets directs. Par conséquent, il est nécessaire d'étudier les dommages d'ADN induits par haut A LAISSÉ le rayonnement, qui est également utile de clarifier le mécanisme moléculaire de l'effet biologique relatif élevé de haut A LAISSÉ le rayonnement.

Dans l'étude des dommages d'ADN provoquée par des rayonnements ionisants, il est évidemment utile d'obtenir des résultats expérimentaux plus précis et plus fiables pour choisir le système approprié de dissolution d'ADN. Le système de dissolution le plus commun de l'ADN est tampon de te, et ses composantes principales sont 10 mmol/L tris (aminomethane triméthylique) et 1 mmol/L EDTA (acide tétraacétique d'éthylènediamine) à pH 8,0. Regardons les grands principes de l'étude.

L'ADN du plasmide PUC19 dissoute dans l'eau pure, 10 mmol/L Tris, 1 mmol/L a mené le RA et le tampon de te a été irradié par le faisceau d'ions de carbone de 100 kev/P.M. (mev/U) d'énergie initiale 290. La proportion de diverses molécules d'ADN dans différentes solutions a été analysée par l'électrophorèse de gel d'agarose, et le nombre moyen de coupures de monocaténaire (SSB) et de coupures de double mèche (DSB) dans chaque plasmide a été calculé à différentes doses.

On l'a constaté que Tris pourrait de manière significative protéger l'ADN de plasmide contre l'irradiation lourde d'ion de carbone en empêchant la production de SSB et de DSB, alors que l'EDTA pourrait augmenter la production de SSB et empêcher la formation de DSB.

Electrophoretogram de molécule d'ADN pUC19 dans différente dose de solution et d'irradiation

Il peut voir de la figure ci-dessus qui avec l'augmentation de la dose d'irradiation, le pourcentage de l'ADN supercoiled dans des diminutions totales d'ADN. Comparé à l'eau et à l'EDTA, le contenu de l'ADN supercoiled dans Tris et le tampon de te ont diminué lentement. Quand la dose a grimpé jusqu'à 150Gy, le contenu de l'ADN supercoiled dans le tampon de Tris et de te était toujours plus de 80%, mais le contenu de l'ADN supercoiled dans l'EDTA et l'eau était moins de 6O%. Les résultats ont prouvé que l'ADN dans tri produit moins de coupures de brin que cela en eau et EDTA.

Une série de résultats prouve que Tris exerce l'effet protecteur évident sur des dommages de coupure de brin d'ADN induits par 100 kev/L | irradiation d'ion de carbone de m. Dans des solutions tampon de Tris et de te, l'ADN supercoiled a existé tout le temps et a montré la protection évidente comparée à l'eau et à la solution pures d'EDTA.