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Préparation de Bicine, d'EPPS et de tout autre tampon biologique

2020-01-08
Préparation de Bicine, d'EPPS et de tout autre tampon biologique

Dans des expériences ou des essais biochimiques, presque toutes les réactions doivent être contrôlées dans une certaine marge de pH, particulièrement ceux qui impliquent des enzymes. Les changements de pH ont un plus grand impact sur la réaction, ainsi des tampons biologiques sont utilisés pour maintenir la valeur du pH de l'environnement de réaction. Dans des expériences biochimiques, bon nombre d'entre elles simulent la réaction de détection dans l'organisme, qui exige également d'un pH élevé. Le corps biologique est réglé par liquide humoral, ainsi le tampon biologique est nécessaire dans l'expérience.

Il y a beaucoup de types de tampon biologique, et les méthodes de préparation sont quelque peu différentes, mais le principe est généralement identique. L'hydroxyde de sodium est habituellement ajouté à l'acide conjugué ou l'acide chlorhydrique est ajouté à la base conjuguée. Les deux méthodes peuvent former une solution tampon avec la concentration suffisante des paires conjuguées d'acide-base. Voici la méthode de préparation d'un peu (au sujet de 1-2l) de dihydroxyethylglycine Bicine ou d'acide propionique EPPS de hydroxyethylpiperazine :

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Préparation de tampon de Bicine
 
(1) solution de 0.1M (a) : L'eau désionisée par 16.317g/1,000ml de Bicine
 
(2) solution de NaOH de 0.1m (b) : L'eau désionisée par 4g/1,000ml de NaOH
 
(3) le pH 5,1 1000 ml + 0 ml (b) (a) (a) : (b) = 5-0
 
PH 7,8 + 200 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = 5 à 1
 
PH 8,2 + 400 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = 5-2
 
PH 8,6 + 600 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = o
 
PH 10,4 + 800 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = cinq
 
Préparation de tampon d'EPPS
 
(1) solution de 0.1M (a) : L'eau désionisée par 25.233g/1,000ml d'EPPS
 
(2) solution de NaOH de 0.1m (b) : L'eau désionisée par 4g/1,000ml de NaOH
 
(3) le pH 5,2 1000 ml + 0 ml (b) (a) (a) : (b) = 5-0
 
PH 7,3 + 200 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = 5 à 1
 
PH 7,8 + 400 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = 5-2
 
PH 8,2 + 600 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = o
 
PH 8,8 + 800 ml 1000 ml (a) (b) (a) : (b) = cinq
 
 
Il convient noter cela : la température de préparation est commandée à 20 degrés. Si la valeur du pH précise est nécessaire, elle peut être mesurée avec le compteur pH d'A, et puis la proportion de la solution A et de la solution B peut être ajustée sur la valeur du pH spécifique d'A. S'il est nécessaire d'exclure des ions de sodium dans l'environnement de test, il est également possible de remplacer l'hydroxyde de sodium par l'hydroxyde de potassium et de changer le poids selon le poids moléculaire correspondant.
 
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