Optimisation de la méthode de DESSUS pour la détermination des acides gras libres

La détermination des acides gras libres dans le sérum ou le plasma adopte habituellement la méthode photométrique d'enzymes de chromogène de Trinder. Cependant, en raison des caractéristiques de cet essai, la détection des acides gras est affectée par beaucoup de facteurs, et la méthode de dépistage doit être optimisée et améliorée pour améliorer l'exactitude de la détection.

Principe de la détection FFA de chromogène de Trinder :

La méthode de dépistage a trois étapes de réaction : les acides gras libres (FFA ou NEFA) réagissent avec le CoA excédentaire pour produire du l'acyle-CoA sous l'action du synthase acétyle-CoA (ACS), et réagissent avec l'oxygène sous l'action de l'oxydase acétyle-CoA (ACO). La réaction produit de 2,3 CoA transport-enoyl et peroxyde d'hydrogène, et la réaction de Trinder est employée pour détecter le peroxyde d'hydrogène, et le contenu de FFA peut être obtenu.

Des DESSUS est recommandés pour la détermination de FFA du chromogène

Problèmes dans des méthodes de détermination et d'optimisation de FFA :

1. Le coenzyme excessif A dans la réaction interférera la réaction du peroxyde d'hydrogène et du chromogène de Trinder, faisant le bas entier de résultat d'essai. N-ethylmaleimide (PAS MENTIONNÉ AILLEURS) peut être employé pour enlever le coenzyme excédentaire A. La stabilité de PAS MENTIONNÉ AILLEURS est très affectée. Limité, seulement une semaine.

2. L'oxydase de CoA de synthétase et d'acétyle de CoA d'acétyle utilisée ont différentes spécificités de substrat pour différents acides gras libres, causant des différences dans les résultats de détermination. Les différentes sources d'enzymes ont différentes spécificités de substrat pour les acides gras libres avec différentes portées de C. C'est-à-dire, la capacité de réponse est différente. Il y a 6 genres de FFA en sérum humain, et seulement les enzymes avec la spécificité élevée à eux ne peuvent faire aucune différence dans les résultats de mesure.

3. En raison de l'influence du CoA sur la réaction, la gamme linéaire des résultats de données est étroite. La couleur de FFA a mesuré sur le marché est MEHA, TBHB, TOOS, etc., mais elle est considérablement interférée par le CoA, et elle doit être excessive, ainsi l'interférence est exigée. Moins de chromogène. SCEP n'est pas a interféré par le coenzyme A mais est instable. Les AGITATIONS et les DESSUS sont moins ont interféré par le CoA, et les DESSUS a un coefficient d'absorption molaire plus élevé, ainsi c'est un meilleur substrat de chromogène.

4. Ajoutez DTNB complexe sulfhydrylique et MIT pour réduire la quantité de PAS MENTIONNÉ AILLEURS. Le groupe sulfhydrylique de DTNM peut réagir avec le groupe sulfhydrylique de CoA pour enlever l'interférence sur le chromogène. Un peu de MIT peut enlever le groupe sulfhydrylique de CoA et agit également en tant qu'agent de conservation. Basé sur l'utilisation du chromogène de DESSUS, on peut complètement éliminer l'interférence du CoA, et la stabilité est considérablement améliorée.

Si vous avez des conditions plus élevées pour des résultats de détermination de FFA, vous pouvez choisir un kit de meilleure qualité basé sur les points ci-dessus. Desheng produit les matières premières pour le FFA et d'autres kits de détermination d'index. Si des DESSUS est employés pour déterminer FFA directement, en raison de la stabilité pauvre de la solution, on lui recommande de préparer une solution de travail pour l'utilisation immédiate avant emploi.