Méthode pour stabiliser l'enzyme et le substrat chromogène dans la réaction de Trinder

Dans le domaine du diagnostic in vitro, la colorimétrie enzymatique est une méthode courante pour les tests quantitatifs ou qualitatifs des composants cibles et elle est largement utilisée en Chine,comme la méthode de détection de la réaction de couleur de l'enzyme HRP catalysée par le substrat chromogéniqueLes TOOSEn raison de la participation des enzymes, il est très utile d'améliorer la stabilité du substrat de couleur en activité enzymatique.

Certains produits de réaction avec des substrats chromogéniques à absorbance molaire élevée, tels que TOOS, TOPS, etc., peuvent être utilisés dans les méthodes chimiques humides ainsi que dans les méthodes chimiques sèches:les réactifs de réaction requis (TOOS), 4-AAP) et les enzymes requises (HRP) etc.) Il est fixé sur le support de membrane et l'échantillon est ajouté par goutte à goutte pour générer H2O2 et libérer ensuite un nouvel oxygène écologique,oxyde le substrat de couleurLes enzymes sont très spécifiques et très efficaces en catalyse.ils ont une faible stabilité sous l'influence de la températureDans les méthodes chimiques humides, les enzymes sont facilement inactivées lorsqu'elles sont à l'état liquide ou à faibles concentrations.

Poudre de TOOS, substrat chromogénique

D'autre part, la plupart des substrats chromogéniques, tels que TOOS, MAOS, TMB, etc., sont également facilement oxydés lentement, de sorte que leurs solutions ne peuvent pas être exposées à l'air pendant une longue période.Il existe de nombreuses façons d'améliorer la stabilité des enzymes biologiquement actives et des substrats chromogéniques:

1L'ajout d'un agent protecteur en solution enzymatique peut rendre l'activité de diverses enzymes telles que l'ALT, l'AST, la LDH, l'ALP, la CK dans une solution aqueuse ou dans la matrice sérique stable pendant 2 semaines à température ambiante.mais l'effet sur le papier d'essai chimique sec n'est pas significatif.

2La méthode de stabilisation du substrat à développement de couleur utilise des tensioactifs et des substances pigmentées flavonoïdes avec un groupe alkyl de 8 à 16 atomes de carbone, mais la formule est compliquée.les réactifs sont difficiles à acheter, et l'agent protecteur interfère avec les résultats de l'essai.

3Il existe un agent protecteur plus réductible que le substrat de développement de la couleur, mais l'agent protecteur ajouté contient des groupes aminés primaires et provoque souvent des réactions non spécifiques.

4L'utilisation de colorants azoïques comme stabilisateurs du substrat de développement de la couleur a un bon effet stabilisant et ne provoque pas d'interférence.mais la longueur d'onde maximale d'absorption de la teinture est parfois proche de celle de l'agent colorant, ce qui rend le contrôle en blanc un peu plus élevé.

5. un agent protecteur pour le polymère et sa composition, qui peut améliorer la stabilité des enzymes et des substrats chromogéniques.adapté à l'HRP, CHO, etc. Enzyme adaptée à la détection du glucose, de la créatinine, de l'acide urique, du cholestérol, des triglycérides et d'autres indicateurs.

Il est possible de voir que divers agents de protection existants pour les enzymes ouSubstrats chromogéniques, dont certains sont défectueux, tels que le coût élevé, la détection biaisée, et ne conviennent qu'aux méthodes chimiques humides, etc.,améliorer ainsi la stabilité des enzymes et des substrates chromogéniques. Desheng est un fabricant de substrats chromogéniques et d'enzymes. Il est recommandé de faire plus attention à l'utilisation de substrats chromogéniques et d'enzymes.