Méthode pour stabiliser l'enzyme et le substrat chromogène dans la réaction de Trinder

Dans le domaine des diagnostics in vitro, la colorimétrie d'enzymes est une méthode commune pour l'essai quantitatif ou qualitatif des composants de cible, et elle est très utilisée en Chine, telle que la méthode de dépistage de coloration de l'enzyme HRP catalysée par le substrat chromogène TOOS dans la réaction de Trinder. En raison de la participation des enzymes, elle est de grande valeur pour améliorer la stabilité du substrat de couleur d'activité enzymatique.

Quelques produits de réaction avec les substrats chromogènes d'absorbance molaire élevée, tels que TOOS, DESSUS, etc., peuvent être employés dans des méthodes chimiques humides aussi bien que des méthodes chimiques sèches : les réactifs exigés de réaction (TOOS, 4-AAP) et les enzymes exigées (HRP) etc.) il est fixe sur le transporteur de membrane, et l'échantillon est ajouté goutte-à-goutte pour produire de H2O2 et puis pour sortir le nouvel oxygène écologique, oxyde le substrat de couleur, et détermine indirectement le composant de cible par la quantité du produit de réaction. Les enzymes sont fortement spécifiques et très efficaces dans la catalyse. Cependant, elles ont la stabilité pauvre sous l'influence de la température, de la pression, et de la lumière dans des méthodes chimiques sèches. Dans des méthodes chimiques humides, des enzymes sont facilement inactivées quand elles sont dans un état liquide ou à de basses concentrations.

Poudre chromogène du substrat TOOS

D'autre part, la plupart des substrats chromogènes, tels que TOOS, MAOS, TMB, etc., sont également facilement oxydés lentement, ainsi leurs solutions ne peuvent pas être exposées pendant longtemps à l'air. Il y a beaucoup de manières d'améliorer la stabilité des enzymes biologiquement actives et des substrats chromogènes :

1. Ajouter l'agent protecteur de solution d'enzymes peut faire l'activité de diverses enzymes telles qu'alt, AST, LDH, l'ALPE, CK dans l'écurie de matrice de soluté ou de sérum pendant 2 semaines à la température ambiante, mais l'effet sur le papier réactif chimique sec n'est pas significatif.

2. La méthode couleur-en développement de stabilisation de substrat emploie des agents tensio-actifs et des substances flavonoïdes de colorant avec un groupe alcoyle avec 8 à 16 atomes de carbone, mais la formule est compliquée, il est difficile acheter les réactifs, et l'agent protecteur interfère les résultats d'essai.

3. Il y a un agent protecteur qui est plus réductible que le substrat couleur-en développement, mais l'agent protecteur supplémentaire contient les groupes aminés primaires et cause souvent des réactions non spécifiques.

4. L'utilisation des teintures azotées comme stabilisateurs du substrat couleur-en développement a un bon effet stabilisateur et ne cause pas l'interférence, mais la longueur d'onde maximum d'absorption du colorant est parfois près de celle de l'agent couleur-en développement, qui fait au contrôle vide un peu plus haut.

5. Un agent protecteur pour le polymère et sa composition, qui peuvent améliorer la stabilité des enzymes et des substrats chromogènes. Les substrats chromogènes applicables incluent TOOS, 4-AA, DESSUS, MAOS, etc., appropriés à HRP, à CHO, à enzyme etc., à appropriés à la détection du glucose, de la créatinine, de l'acide urique, du cholestérol, du triglycéride et d'autres indicateurs.

Il peut voir que les divers agents protecteurs existants pour des enzymes ou des substrats chromogènes, certains dont sont défectueuse, comme le coût élevé, la détection décentrée, et seulement approprié aux méthodes chimiques humides, etc., de ce fait améliorant la stabilité des enzymes et des substrats chromogènes la méthode a besoin davantage de recherche. Desheng est un fabricant des substrats et des enzymes chromogènes. On lui recommande que vous prêtiez plus d'attention à l'utilisation des substrats et des enzymes chromogènes.