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Instructions d'utilisation du tampon HEPES

2020-06-13
Instructions d'utilisation du tampon HEPES

Acide 4-hydroxyéthylpiperazinéthanosulfonique, dénomméHEPESIl a des propriétés similaires à celles de l'EPPS et est couramment utilisé pour les protéines et les enzymes sensibles au pH.

Propriétés physiques et chimiques: HEPES

Formule moléculaire: C8H18N2O4S

Poids moléculaire: 238.31

Statut: poudre cristalline

pKa:7.45 à 7.65

Portée tampon: 6,8-8.2

Structure du bâtiment

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Pureté: supérieure à 99%

Concentration d'utilisation: 10 à 50 mmol/l

 

En fonction de l'application, les tampons HEPES sont soumis à deux systèmes de tampon couramment utilisés:

HEPES solution tampon: HEPES + NaOH (500 ml): 119,15 g de HEPES sont dissous dans 400 ml d'eau distillée, une solution aqueuse de 0,5 à 1 M NaOH est ajoutée pour ajuster au moins le pH requis,attention à la plage de pH tampon efficace est de 6.8 à 8.2, puis utiliser de l'eau distillée pour faire le volume à 500 ml;

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2. HEPES solution saline tamponnée: HEPES 6,5 g, NaCl 8,0 g, Na2HPO4·7H2O 0,198 g, ajuster la valeur du pH avec 0,5 M de solution aqueuse de NaOH, et faire le volume à 500 ml.

3.2×HEPES solution saline tamponnée: dissoudre 1,6 g de NaCl, 0,074 g de KCl, 0,027 g de Na2HPO4.2H2O, 0,2 g de glucan ou de dextran et 1 g de HEPES dans 90 ml d'eau distillée,et ajuster au pH requis avec 0.5 M de valeur de NaOH, puis dilué à 100 ml avec de l'eau distillée.La solution de culture cellulaire HA ne contient pas d'ions calcium et de magnésium, mais contient du BSA.

 

Les avantages du tampon HEPES:

1Contrairement à la PEcine, le HEPES ne contient pas de groupes de coordination et ne peut pas former de complexes stables avec la plupart des ions métalliques.

2. L'HEPES a une très bonne solubilité dans l'eau et sa plage de tampon est proche de neutre.Il n'est donc pas adapté aux systèmes redox et a des ions relativement importants.La force, le PIPES est plus acide.

3Le HEPES n'a pas d'effets toxiques ni d'effets secondaires sur les cellules à faible concentration et peut contrôler une plage de pH constante pendant une longue période.et le milieu de culture général contient 20 mmol/L de HEPES pour obtenir une capacité tamponPar conséquent, il est couramment utilisé dans la solution HA, la solution de culture cellulaire, la solution de conservation du virus et même les produits de soins de la peau.

 

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