Choisir le bonbiologiquele tamponIl existe de nombreuses options disponibles (Hepes, Mops, Tris, Bis-Tris, etc.), ce qui peut facilement créer de la confusion.
Après avoir compris ces défis, Desheng a préparé une courte liste pour votre référence lors du choixle tamponsels pour la recherche:
1. Plage de tampon
Chaque réactif tampon a une plage de pH avec le plus fortle tamponCette capacité de tampon est généralement déterminée par le pKa de lale tamponVous devez choisir un tampon dont la valeur de pKa est proche du milieu de la plage souhaitée (en général, il est recommandé d'utiliser un tampon dele tamponavec une valeur de pKa qui se situe au moins dans une unité de pH de la valeur cible de pH).
La plage de pH applicable de chaque tampon
2. changements de pH pendant l'expérience
Il est essentiel de déterminer à l'avance si la valeur du pH peut augmenter ou diminuer au cours de l'expérience.le tampons. Si vous pensez que le pH va augmenter pendant l'expérience, vous devez choisir un tampon dont le pKa est légèrement supérieur à la valeur optimale au début de l'expérience.si vous pensez que le pH va diminuer, choisir un tampon avec un pKa inférieur.
3. Concentration du tampon
La concentration de tampon doit être réglée de manière à ce qu'elle ait une capacité de tampon suffisante pour le système expérimental.le pH de la solution ne peut pas être stabiliséEn revanche, si la concentration est trop élevée, le tampon est susceptible d'affecter l'expérience.
Pour les systèmes dans lesquels l'échange de protons d'hydrogène n'est pas actif, une concentration de 25 à 100 mM est généralement recommandée.le tamponLa concentration est 20 fois supérieure à la concentration molaire des protons échangés.
Lors de la préparation d'unle tamponS' il y a une solution, n'oubliez pas d' ajuster la concentration de la solution à la concentration d' utilisation prévue.
4Changement de température
Le pH de la solution tampon doit être réglé en fonction de la température à laquelle l'expérience sera réalisée.et donc le pH et la capacité de tamponnage du systèmeCette situation peut être critique dans les systèmes biologiques, où des concentrations précises d'ions hydrogène sont nécessaires pour que le système de réaction fonctionne à un rendement maximal.
Le pKa de certains tampons (tels que PIPES) est moins sensible aux changements de température, mais d'autres options (tels queLes résultatsCes changements sont plus fréquents chez les patients atteints de troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine, des troubles de l' hémoglobine et des troubles de l' hémoglobine.
La figure ci-dessous montre la variation approximative de pKa en fonction de la température de la biobuffer de Desheng:
Variation approximative du pKa de la température de la biobuffer de Desheng
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