Acide 4-hydroxyéthylpipérazine-éthanosulfonique, abrégéHEPESen anglais, a un numéro CAS de 7365-45-9. Il apparaît sous forme de poudre cristalline blanche et a une plage de pH stable comprise entre 6,8 et 8.2En tant qu'agent tampon biologique, la régulation du pH est son utilisation la plus courante et est très appréciée par les principaux fabricants dans le domaine des soins de la peau.son rôle crucial dans la détection du virus de la rage est peu connu, et nous allons fournir une introduction détaillée ci-dessous.
Le dilemme des méthodes traditionnelles de détection du virus de la rage
Lorsque le virus de la rage se reproduit dans les cellules infectées, il ne provoque généralement pas d' effets cytopathiques (EPC), et il est également difficile de former des plaques dans des conditions de culture conventionnelles.Bien que de nombreux chercheurs à l' intérieur et à l' étranger ont établi avec succès des méthodes de plaque du virus de la rage sur les cellules d' embryon de poulet et les cellules BHK-21Ces méthodes présentent des inconvénients évidents: certaines ont des exigences extrêmement strictes pour les conditions d'expérimentation, nécessitant un contrôle précis de divers facteurs tels que la température, l'humidité, la température et la température.composition des gaz, etc. Certaines étapes de fonctionnement sont compliquées et nécessitent une formation de longue durée de techniciens professionnels pour les maîtriser correctement,Ce qui limite fortement la promotion et l'application de ces méthodes..
Application révolutionnaire du HEPES dans la détection du virus de la rage
Les chercheurs ont accidentellement découvert que le HEPES peut augmenter l'effet pathogène du virus de la rage sur les cellules infectées.Des chercheurs ont mis au point une méthode simple et rapide de gravure sur plaque HEPES pour le virus de la rage..
Le HEPES favorise considérablement la formation de taches de corrosion
Dans l'expérience, des cellules infectées ont été cultivées à 37 °C pendant 3 à 5 jours, puis un groupe de cellules infectées a été traité par HEPES.Des lésions cellulaires évidentes peuvent être clairement observées au bas du revêtement.Par la suite, une teinture cristalline violette a été utilisée, et les taches de corrosion étaient clairement visibles.le groupe de cellules infectées sans traitement par HEPES n' a montré ni effets cytopathiques ni formation de plaqueCe résultat expérimental démontre fortement que le HEPES a un effet promouvant significatif sur la formation de plaque du virus de la rage sur les cellules BHK.
La méthode de gravure HEPES est très sensible.
L'analyse de la plaque HEPES est non seulement facile à utiliser, mais elle est également efficace dans la titration des titres d'infection virale.Les données expérimentales montrent qu' il existe une relation claire entre le nombre de plaques formées après une infection virale et la dilution du virus.En prenant l'exemple de la souche CTN-BHK du virus de la rage, les titres d'infection ont été déterminés respectivement à l'aide de l'analyse de plaque HEPES et de l'analyse de souris.il a été constaté que le nombre de plaques mesurées par la méthode HEPES des plaques variait de 10, 0 × 10 ° à 4, 0 × 10 * PFU/ ml, tandis que les titres d' infection mesurés par la méthode murine se situaient entre 6, 0 et 6, 8 log ou entre 1, 0 × 10 ° et 6, 3 × 10 / ml.Ce résultat démontre pleinement la cohérence de la sensibilité entre la méthode HEPES rapide de la plaque et la méthode murine..
La méthode de gravure HEPES présente des avantages remarquables
Lors de l'étude de la titration du titre d'infection des souches du virus de la rage CTN-181 et CTN-BNK,il a été constaté que l'utilisation du HEPES peut induire et renforcer efficacement l'effet pathogène du virus de la rage sur les cellules infectéesLa méthode d'opération spécifique est la suivante: après infection virale des cellules, les cultiver à 37 °C pendant 3 à 5 jours,ajouter 50 à 100 mmol/L de HEPES par goutte à goutte sur le couvercle du milieu semi-solide de la méthylcellulose, tacher avec une solution cristalline violette après 24 heures, et sécher à température ambiante pour calculer directement le nombre de taches de corrosion à l'œil nu.Comparé aux rapports précédents sur les méthodes de gravure, cette méthode présente de nombreux avantages tels que la rapidité, la simplicité, l'économie, la sensibilité et la facilité de maîtrise.
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