Actualités de l'entreprise Analyse approfondie de l'application du HEPES à la transfection des protéines
HEPES: le "gardien du pH" de la transfection des protéines
1- Un tampon précis pour protéger l'environnement de transfection
La transfection des protéines est une technologie clé dans la recherche sur la fonction des gènes, le développement de médicaments et la thérapie cellulaire, mais ce processus nécessite une stabilité extrêmement élevée dans l'environnement de culture cellulaire.Puffer HEPES, en tant que tampon non ionique, présente l'avantage principal de maintenir avec précision la stabilité du pH du milieu de culture.les substances acides produites par la dissolution du CO2 peuvent perturber l'équilibre du pH, et le HEPES peut rapidement neutraliser ces substances acides, évitant ainsi l'impact des fluctuations du pH sur l'efficacité de la transfection.Des expériences ont montré que l'utilisation du système de tamponnage HEPES peut réduire efficacement les dommages cellulaires causés par un déséquilibre du pH, fournissant un microenvironnement idéal pour la transfection des protéines.
2Compatible avec des systèmes complexes pour améliorer l'efficacité de la transfection
La compatibilité entre les réactifs de transfection (tels que les liposomes, la polyéthylèneimine, etc.) et les agents tampons a une incidence directe sur l'efficacité de la transfection.La structure chimique du HEPES est stable et ne réagit pas avec les réactifs de transfection.En outre, le HEPES peut tamponner efficacement à faibles concentrations,éviter les interférences avec la perméabilité de la membrane cellulaire causées par des concentrations ioniques élevées, améliorant ainsi l'efficacité de l'administration des protéines exogènes.
Les avantages multidimensionnels du HEPES: de la protection des cellules à l'optimisation expérimentale
1Protection des cellules: réduction du stress oxydatif et de la toxicité
Au cours du processus de transfection, les cellules peuvent produire une grande quantité d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) en raison de troubles métaboliques, entraînant des dommages dus au stress oxydatif.Les propriétés antioxydantes du HEPES peuvent inhiber la production de ROS et réduire les dommages oxydatifs cellulairesEn même temps, sa structure non ionique évite le problème de chélation des ions métalliques que peuvent causer les agents tamponnants traditionnels, réduisant ainsi l'effet toxique des ions métalliques sur les cellules.Des recherches ont montré que le système tampon HEPES peut améliorer de manière significative le taux de survie des cellules transfectées, assurant la fiabilité des résultats expérimentaux.
2Optimisation expérimentale: simplifier les opérations et améliorer la répétabilité
Le HEPES peut être rapidement dissous à température ambiante sans traitement complexe et peut être directement ajouté au milieu de culture, simplifiant ainsi le processus expérimental.Il a une grande stabilité chimique et peut maintenir les performances de tamponnage même dans la culture à long terme, assurant la cohérence des lots dans les expériences de transfection.L' HEPES n' a pas d' effet inhibiteur sur la croissance cellulaire et favorise la prolifération et l' expression fonctionnelle soutenues des cellules transfectées., assurant une recherche ultérieure.
Scénarios d'application innovants du HEPES dans la transfection des protéines
1L'édition de gènes et la technologie CRISPR
Dans les expériences de transfection CRISPR/Cas9, le système tampon HEPES a considérablement amélioré l'efficacité de livraison de l'ARN sg et de la protéine Cas9, améliorant ainsi la précision de l'édition des gènes.Ses performances de tamponnage doux aident à réduire l' activité des nucléases non spécifiques, réduire les effets hors cible et fournir un outil fiable pour la recherche en thérapie génique.
2Production de protéines recombinantes
Pour les lignées cellulaires qui nécessitent une expression efficace de protéines exogènes, telles que les cellules CHO, le système tampon HEPES peut maintenir la stabilité de l'environnement du réticulum endoplasmique (RE),favoriser le pliage et la sécrétion corrects des protéines, améliorer le rendement et la pureté des protéines et répondre aux besoins de l'industrie biopharmaceutique.
3Transfection des cellules souches et des cellules immunitaires
Dans la reprogrammation iPSC et la préparation de cellules CAR-T, la performance de tamponnage du HEPES peut protéger les cellules sensibles du choc osmotique, maintenir la pluripotence cellulaire ou l'activité immunitaire,et fournir un soutien technique pour la médecine régénérative et l'immunothérapie tumorale.
Conclusion
L'application du HEPES dans la transfection des protéines est non seulement une percée technologique, mais aussi une innovation dans le paradigme de la recherche en sciences de la vie.Hubei Xindesheng Material Technology continuera d'être axée sur le client et axée sur l'innovation technologique, offrant de meilleurs produits et services aux chercheurs du monde entier et promouvant conjointement les sciences de la vie à de nouveaux sommets.
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