Nous ajoutons toujours des solutions tampons lors de l'électrophorèse de l'ADN. Les solutions tampons couramment utilisées comprennent le TAE, qui contient du Tris, de l'acétate et de l'EDTA, et le TBE (Tris-borate-EDTA).
L'une des fonctions du tampon est de maintenir le pH de la solution stable.une réaction d'oxydation se produit à l'anode pour générer des ions oxygène et hydrogèneUne électrophorèse à long terme rendra l'acide anodique et la cathode alcalines.Un bon système tampon doit avoir une forte capacité de tampon pour maintenir le pH de la solution à deux pôles essentiellement stableUne autre fonction du tampon d'électrophorèse est de faire en sorte que la solution ait une certaine conductivité pour faciliter la migration des molécules d'ADN.L'ADN est une substance alcaline qui est chargée négativement pendant l'électrophorèse (pH tampon = 8) et migre de l'électrode négative à l'électrode positive.
Un autre composant du tampon d'électrophorèse est l'EDTA, dont le but est de chéler le plasma Mg2+ et d'empêcher l'activation de la DNase pendant l'électrophorèse.L'EDTA peut maintenir ces ions fermement pour éviter la dégradation des acides nucléiquesMais il convient de noter que les ions magnésium sont également des cofacteurs de nombreuses enzymes, telles que les enzymes de restriction, les polymérases d'ADN, etc.,la concentration d' EDTA n' est donc généralement pas trop élevée (généralement autour de 1mM).
DeshengPuffer TRISemballage
Donc, lequel est le meilleur, TAE ou TBE? En fait, lequel devrais-je utiliser pour l'électrophorèse de l'ADN? Cela dépend vraiment de l'objectif de votre expérience.
1La conductivité du TBE est supérieure à celle du TAE. Par conséquent, par rapport au TAE, le TBE est moins susceptible de provoquer une surchauffe dans le réservoir d'électrophorèse.La TBE est recommandée pour l'électrophorèse à long terme..
2L'acide borique est un inhibiteur d'enzyme, donc si vous avez besoin de séparer l'ADN par électrophorèse pour la réaction de digestion, il est recommandé d'utiliser le TAE comme solution tampon d'électrophorèse.
3Pour les fragments inférieurs à 300 bp, la vitesse de migration dans le TBE est plus rapide sur un gel d'agarose à 2%.
4Les fragments de plus de 2 kb migrent plus rapidement dans le TAE (dans un gel d'agarose à 0,8%), et la vitesse est d'environ 10% plus rapide que dans le TBE.Le TAE est plus approprié pour la récupération de fragments d'ADNComparé à la TBE, la TAE a une résolution plus élevée pour l'ADN superenroulé.
En résumé, la question de savoir si TBE ou TAE est préférable ne peut être généralisée.Le tampon biologique développé par Desheng a une large gamme de tamponsLe système peut préparer des tampons avec une large gamme de valeurs de pH, et peut fournir diverses spécifications d'emballage.Bienvenue à consulter et à acheter.
