Le substrat de chromogène COMPLÈTE la détermination des étapes d'acide gras libre

La détermination de l'acide gras libre (AFA) dans le sérum est un important indice d'essai biochimique et l'AFA est étroitement liée à la santé humaine.Parce que les composants du sérum sont complexes et qu' il existe de nombreux types de FFA., la détection est affectée par de nombreux facteurs, de sorte que le substrat chromogèneLes TOPSest généralement utilisé pour déterminer l'AFE.

Réactif TOPS au substrat de chromogène

Détermination des TOPS du chromogène par étapes FFA:

1Dans le récipient, ajoutez d'abord la solution tampon pesée selon le rapport de la formule, puis ajoutez de l'ATP, de la coenzyme A, de la 4-aminoantipyrine, de l'activateur ionique (chlorure de magnésium), du stabilisateur (BSA),et conservateur en séquenceAprès avoir ajouté une quantité appropriée d'eau, ajouter un surfactant, ajuster le pH à pH 6-9 avec de l'acide chlorhydrique concentré, ajouter enfin de l'acyl-CoA synthase, puis remuer et filtrer.et ajouter de l'eau distillée au filtrat pour obtenir le réactif A quantitativement.

2. Ajouter du tampon au récipient, puis ajouter du chromogène TOPS, de l'eau, du tensioactif à son tour, ajuster le pH à pH 6-9, enfin ajouter HRP et acétyl CoA oxydase, puis remuer et filtrer,puis ajouter de l'eau distillée au filtrat obtenu jusqu'à une quantité quantitative, on obtient le réactif B.

3. Remplir les réactifs ci-dessus dans des flacons et les conserver à 2-8°C. Prendre le réactif A et l'échantillon, les mélanger dans un certain rapport, les incuber pendant une certaine période,et lire la valeur d'absorption A1; ajouter le réactif B et mélanger uniformément, incuber pendant une certaine période de temps, et lire la valeur d'absorbance A2.

Préparez le tampon:

Dans un récipient en verre propre, ajouter d'abord un tampon HEPES (tampon de Good, tampon zwitterionique, y compris HEPES, Tris, MES, MOPS, etc.) pesé selon le rapport de la formule,ajouter une quantité appropriée d'eau, puis ajouter le tensioactif 5 ml/ L TritonX-100, utiliser de l' acide chlorhydrique concentré pour ajuster le pH à 6 à 9, la quantité est d' environ 5 ml/ L, puis remuer et filtrer,puis ajouter de l'eau distillée au filtrat obtenu à une quantité.

La méthode d'utilisation des TOPS commeSubstrate de chromogènepour détecter le FFA dans le sérum ou le plasma, il a une grande précision et une faible erreur de mesure, et c'est la couleur la plus appropriée parmi les nombreux chromogènes de Trinder, qui est faible en acétyl CoA, élevée en stabilité,et un coefficient d'absorption molaire élevéOutre TOPS, les substrats chromogéniques produits par Desheng comprennent TOOS, MAOS, ADPS, etc., qui sont adaptés à la détection de la glycémie et d'autres indicateurs biochimiques.