Immunoessai de chimiluminescence et immunoessai de fluorescence

Dans le domaine du diagnostic in vitro, l'analyse immunologique par chimioluminescence CLIA et l'analyse immunofluorescence IFA sont des méthodes de détection couramment utilisées,et finalement les deux sont détectés par un photomètre, mais les principes des deux sont essentiellement différents.

Comparé au test radioimmunologique, au test immunologique par fluorescence et au test immunologique lié aux enzymes, le test immunologique par chimioluminescence présente plus d'avantages.forte spécificitéIl n'exige pas d'équipement très coûteux, il est libre de rayonnement, le marqueur a une longue période de validité et peut être entièrement automatisé.

Réactif de chimioluminescence acridinium ester

La différence entre immunité par chimioluminescence et immunité par fluorescence:

Bien que les deux soient des réactions de luminescence, la différence la plus intuitive est que la chimiluminescence est la propre luminescence du réactif,tandis que la fluorescence est irradiée par une source lumineuse (généralement ultraviolette) et émet ensuite de la lumièreLe principe d'émission de lumière des deux est différent, de sorte que les résultats de détection seront également différents.

La chimioluminescence est l'utilisation de l'énergie générée par une réaction chimique pour induire des transitions de niveau d'énergie pour émettre de la lumière, comme le luminol détectant les taches de sang.la fluorescence est un phénomène de photoluminescence, et une source lumineuse doit être fournie pour exciter les molécules pour produire des transitions de niveau d'énergie, puis émettre de la lumière.

La chimioluminescence est moins perturbatrice que l' immunité par fluorescence:

Lorsque ces deux méthodes sont utilisées pour l'immunothérapie, la différence est évidente: la chimioluminescence ne nécessite pas de source lumineuse externe et l'interférence de fond est faible;alors que la fluorescence nécessite une source de lumière externe. Lors de la détection dans la direction de la source lumineuse verticale, la protéine, les acides aminés et d'autres molécules de l'échantillon biologique seront également détectés.et le fond est légèrement plus hautIl est nécessaire de choisir des réactifs fluorescents appropriés et des méthodes de traitement des échantillons pour réduire l'influence de l'adsorption non spécifique des protéines.

Dans la méthode directe, l'anticorps de chaque antigène doit être étiqueté de manière fluorescente, et celui étiqueté de manière fluorescente peut affecter le titre de l'anticorps ou même devenir invalide.La méthode indirecte ne nécessite que la production de l'anticorps correspondant à l'antigène correspondant.Il n'est pas nécessaire d'étiqueter fluorescentement chaque anticorps, et il a peu d'effet sur le titre de l'anticorps primaire.L'interférence de la chimioluminescence est très faible et la spécificité très élevée.L'utilisation de l'ensemble de la méthode est limitée par la non-spécificité de l'analyse chimique elle-même.Le développement des matériaux de perles magnétiques a rendu le développement de la technologie de la chimioluminescence de plus en plus mature.

Dans le développement de réactifs de diagnostic in vitro, Desheng a réussi à utiliser des réactifs d'immunodétection liés aux enzymes et des réactifs de chimioluminescence. Luminol Les tests de dépistage de la chimioluminescence et de l'isoluminol sont tous des réactifs nécessaires dans les tests immunologiques par chimioluminescence. .