Dans les expériences de biologie moléculaire, la précipitation et l'extraction de l'ADN sont des étapes fondamentales dans la recherche génique, la technologie de clonage et le développement de réactifs de diagnostic.la sélection deagents de tamponnage biologiquesaffecte directement la pureté, l'intégrité et l'efficacité expérimentale de l'ADN.L'acide triméthylméthylaminoéthanesulfonique (Puffer TES), en tant qu'agent tampon efficace, a démontré des avantages significatifs dans le domaine de la manipulation de l'ADN en raison de ses propriétés physicochimiques et de sa stabilité uniques.
Les propriétés chimiques des TES: base scientifique de la capacité de tampon
TES, le nom chimique est 2- [trihydroxyméthyl) méthylamino] -1-acide éthanosulfonique,et les groupes d'acide sulfonique et les groupes hydroxyle multiples dans sa structure moléculaire lui confèrent une excellente capacité de tamponnageÀ température ambiante, la valeur de pKa de TES est de 7.5, et la plage de tamponnage efficace couvre un pH de 6,8 à 8.2, qui correspond exactement aux exigences d'activité et de stabilité de l'ADN de la plupart des enzymes biologiques.Le TES présente une résistance plus forte aux changements de température et peut éviter efficacement le risque de dégradation de l'ADN induite par une basse température.
Triple rôle dans l'extraction de l'ADN
1Lyses cellulaires et élimination des protéines
Au cours de la phase de lyse cellulaire, le TES inhibe l'activité des enzymes de l'ADN et protège l'ADN génomique de la dégradation en chélatant des ions métalliques divalents (tels que Mg 2 +, Ca 2 +) dans la solution.Son système tampon maintient simultanément le pH optimal pour les protéases telles que la protéase K (généralement pH 7.5-8.0), accélérant la dégradation des membranes cellulaires et la dégradation des protéines.Des expériences ont montré que l'efficacité de l'élimination des protéines du système de lysis utilisant le tampon TES est améliorée d'environ 25% par rapport aux méthodes traditionnelles, en posant une bonne base pour les étapes de purification ultérieures.
2- régulation sélective de la précipitation de l'ADN
Le TES est une solution tampon composite composée d'acide chlorhydrique Tris, d'EDTA et de SDS (TES-EDTA-SDS), qui permet une précipitation sélective de l'ADN en ajustant la résistance ionique de la solution.À des concentrations de sel élevées (par exemple 2.5M NaCl), les groupes d'acide sulfonique des TES agissent par écran électrostatique, favorisant la répulsion des groupes phosphate entre les molécules d'ADN et formant un état soluble;Lorsque la concentration en sel tombe en dessous de 0.5M, agrégats et précipités d'ADN dus à l'exposition de la colonne vertébrale du phosphate. Ce processus a un effet répulsif sur l'ARN et d'autres impuretés, ce qui se traduit par une pureté de récupération de l'ADN supérieure à 95%.
3Protection de l' activité enzymatique
L' effet protecteur du tampon TES sur l' activité enzymatique est particulièrement important en limitant les réactions de clivage enzymatique.Des recherches ont montré que l'efficacité de coupe des enzymes de restriction (telles que l'EcoRI) utilisant le système de réaction TES est de 18% à 22% supérieure à celle du tampon HEPES.Son environnement pH stable réduit les changements de conformation enzymatique, prolonge la période linéaire des réactions de clivage enzymatique et assure la précision des expériences d'édition de gènes.
Conclusion
Le tampon TES présente des avantages irremplaçables dans la précipitation et l'extraction de l'ADN en raison de son excellente stabilité du pH, de ses propriétés de chélation des ions métalliques et de son effet de protection des enzymes.En optimisant les conditions expérimentales et en explorant de nouveaux scénarios d'application, TES continuera à orienter la recherche en biologie moléculaire vers des directions plus efficaces et plus précises.La maîtrise du mécanisme de tamponnage et des techniques d'application des TES est sans aucun doute la clé pour améliorer le taux de réussite des expériences.
Le tampon TES n'est pas uniquement utilisé dans les cosmétiques. Ses propriétés tamponnantes le rendent important dans l'analyse des protéines, la détermination de l'activité enzymatique et la culture cellulaire.Puffer TES, Desheng peut fournir des matières premières tampons de haute pureté et de différents types. Les clients peuvent effectuer des achats en un seul endroit, économisant du temps et des coûts.S'il vous plaît n'hésitez pas à nous contacter pour acheter à tout moment!
Votre message doit contenir entre 20 et 3 000 caractères!
