Application de PAC (CAS 1135-40-6) dans l'expérience de transmembrane de protéine

Introduction

PAC, 3 (cyclohexylamine) - 1-propanesulfonic l'acide, un produit chimique organique, la poudre cristalline blanche, CAS1135-40-6, est un tampon biologique, utilisé généralement des kits dans les kits diagnostiques biochimiques de kits, d'extraction de DNA/RNA et d'ACP diagnostic. Le tampon pour la chimie enzymatique et la séparation de CLHP des drogues de base est très utilisé dans le processus de transfert de membrane de l'ordonnancement de proteus. PAC protègent se compose de PAC, d'eau désionisée, etc., et son pH est ajusté sur 11,0 au fibronectin de purificationof.

PAC protègent

Points clés d'opération

1. Électrophorèse de SDS-PAGE : selon les conditions conventionnelles (système de PAC : pour > = protéine 20kD ; Système de Tris Tricine : pour la protéine de faible poids moléculaire, aussi pour la protéine de poids) ;

2. Concentration en méthanol : la gamme de la concentration en méthanol dans le tampon electroimprinting de PAC est 0-20% (la concentration en méthanol est haute, utilisé pour le transfert de faible poids moléculaire de protéine ; la concentration en méthanol est basse ou même ne contient pas le méthanol, utilisé pour le transfert de protéine de poids) ;

traitement de la membrane 3.PVDF : sortez la membrane de PVDF, imbibez-la en méthanol pendant plusieurs secondes, et puis mettez-la dans le tampon electroblotting de PAC. (Note : la membrane de PVDF sera empêchée du séchage après opération. Si la membrane est sèche, répétez l'opération de cette étape) ;

4. Traitement de gel : enlevez le gel de gel et l'imbibez dans le tampon de PAC pendant 5-10 minutes. (Note : cette étape peut être omise en transférant quelques protéines de base fortes pi > 9,0) ;

5. Installez la fente de transfert : immergez le papier filtre et l'éponge dans l'électro tampon épongeant, puis pressez le sandwich de impression électrique dans l'ordre de l'éponge, du papier filtre, du film de PVDF, du gel, du papier filtre et de l'éponge, et mettez-le dans une petite fente rotatoire électrique.

6. États de transfert : transfert à la pression 50V constante (100-170 mA) à la température ambiante pour 0.5-2h. (Note : vidangez les bulles entre le gel et le film de PVDF. Par exemple, la protéine au-dessus de 70 KD devrait être transférée pendant un plus long temps) ;

7. Traitement préparatoire de la teinture de membrane de PVDF : sortez la membrane de PVDF et rincez-la avec de l'eau désionisé, imbibez-la en méthanol pendant plusieurs secondes, puis teignez-la ;

8. Teinture de membrane : Bleu brillant de Coomassie teignant (dissolvez 0,1% bleus brillants R-250 de Coomassie en acide acétique de 40% methanol/1%) pendant 30-50 secondes (pas plus de 1 minute), décolorant avec du méthanol de 50% (solution de décoloration de changement fréquemment), lavant avec de l'eau désionisé entièrement, et séchant alors ;

Préparation de CAPSbuffer

1. 10×CAPS (100mmol/L) la solution tampon est préparée comme suit : PAC, 22.13g ; ajoutez l'eau désionisée à 900ml ; ajustez la valeur du pH sur 11,0 avec du NaOH 2mol/L (au sujet de 20ml), puis la diluez à 1L, et la stockez à 4℃.

2. Le tampon electroimprinting de PAC (1×CAPS contenant le méthanol de 10%) est préparé par les méthodes suivantes : 200ml 10 du × PAC ; 200ml de méthanol ; 1600ml de l'eau désionisée.

D'autres applications

PAC est également employée pour fabriquer les matériaux de soudure, le matériel de climatisation et les matières premières pour la fabrication ; elle est également employée pour fabriquer la pyrotechnie ; elle est employée en tant que réactif analytique, transporteur d'échange thermique, et également employée dans l'industrie pharmaceutique ; elle est employée pour la climatisation, pyrotechnie, piles sèches ; elle est également employée comme flux et déshydratant ; elle est employée pour l'adjuvant de salaison de l'isocyanate aqueux dans l'industrie de la peinture. La société de Desheng se spécialise dans la R&D et la production de divers tampons biologiques, y compris PAC, Tris, Bicine, BALAIS, etc., avec le ≥ 99% de grande pureté, le processus stable, les entreprises bienvenues et les personnes davantage à de consultation.