Application de PAC (CAS 1135-40-6) dans l'expérience de transmembrane de protéine

Introduction au projet

Les CAPS, l'acide 3- ((cyclohexylamine)-1-propanesulfonique, un produit chimique organique, poudre cristalline blanche, CAS1135-40-6, est un tampon biologique couramment utilisé dans les kits de diagnostic biochimique,Ensembles d'extraction d'ADN/ARN et ensembles de diagnostic par PCRLe tampon pour la chimie enzymatique et la séparation HPLC des médicaments de base est largement utilisé dans le processus de transfert par membrane du séquençage des protéines.Les CAPSle tampon est composé deLes CAPSL'eau désionisée, etc., et son pH est ajusté à 11,0 pour purifier la fibronectine.

La réserve CAPS

Points clés de fonctionnement

1. électrophorèse SDS-PAGE: selon les conditions conventionnelles (système CAPS: pour les protéines > = 20 kD; système Tris Tricine: pour les protéines de faible poids moléculaire, également pour les protéines de poids moléculaire élevé);

2. Concentration de méthanol: la plage de concentration de méthanol dans le tampon d'impression électronique CAPS est de 0 à 20% (la concentration de méthanol est élevée, utilisée pour le transfert de protéines de faible poids moléculaire;la concentration de méthanol est faible ou ne contient même pas de méthanol, utilisés pour le transfert de protéines de haute masse moléculaire);

3Traitement de la membrane PVDF: retirer la membrane PVDF, la tremper dans du méthanol pendant plusieurs secondes, puis la mettre dans le tampon de décharge électroblotté CAPS (N.B.:la membrane PVDF doit être empêchée de sécher après utilisation. Si la membrane est sèche, répéter cette étape);

4. Traitement au gel: retirer le gel gel et le tremper dans le tampon CAPS pendant 5 à 10 minutes (Note: cette étape peut être omise lors du transfert de certaines protéines basiques fortes PI > 9,0);

5. Installez la fente de transfert: plongez le papier filtre et l'éponge dans le tampon d'électroblotting, puis appuyez sur le sandwich d'impression électrique dans l'ordre de l'éponge, du papier filtre, du film PVDF, du gel,papier filtrant et éponge, et le mettre dans une petite fente électrique rotative.

6Conditions de transfert: transfert à une pression constante de 50 V (100-170 MA) à température ambiante pendant 0,5 à 2 heures.la protéine supérieure à 70 KD doit être transférée pendant une période plus longue);

7. Prétraitement de la teinture de la membrane PVDF: retirer la membrane PVDF et la rincer à l'eau désionisée, la tremper dans du méthanol pendant plusieurs secondes, puis la teindre;

8. teinture par membrane: teinture bleu brillant Coomassie (dissoudre 0,1% de R-250 bleu brillant Coomassie dans 40% de méthanol/1% d'acide acétique) pendant 30 à 50 secondes (pas plus d'une minute),décolorant avec 50% de méthanol (changer fréquemment la solution décolorante), lavage complet à l'eau désionisée, puis séchage;

CAPS préparation de tampons

1. 10×CAPS(100 mmol/L) solution tampon est préparée comme suit: CAPS, 22,13 g; ajouter de l'eau désionisée à 900 ml; ajuster la valeur du pH à 11,0 avec 2 mol/L de NaOH (environ 20 ml), puis diluer à 1 L, et conserver à 4°C.

2. Le tampon d'impression électrique CAPS (1 × CAPS contenant 10% de méthanol) est préparé par les méthodes suivantes: 200 ml de 10 × CAPS; 200 ml de méthanol; 1600 ml d'eau désionisée.

Autres applications

Les CAPSest également utilisé pour la fabrication de matériaux de soudage, d'équipements de climatisation et de matières premières destinées à la fabrication; il est également utilisé pour la fabrication de produits pyrotechniques; il est utilisé comme réactif d'analyse,porteuse d'échangeur de chaleur, et également utilisé dans l'industrie pharmaceutique; il est utilisé pour la climatisation, la pyrotechnie, les batteries sèches; il est également utilisé comme flux et séchage;il est utilisé comme agent de durcissement de l'isocyanate aqueux dans l'industrie de la peintureLa société Desheng est spécialisée dans la R & D et la production de divers tampons biologiques, y compris CAPS, Tris, Bicine, MOPS, etc., avec une pureté élevée ≥ 99%, processus stable,accueille les entreprises et les particuliers pour une consultation plus approfondie.