Actualités de l'entreprise Application du tampon biologique BES dans la chromatographie par filtration au gel
La chromatographie par filtration par gel, également connue sous le nom de chromatographie à tamis moléculaire ou chromatographie à exclusion stérique, est une technologie de séparation basée sur des différences de taille moléculaire.Dans la recherche en biochimie et en biologie moléculaireLa chromatographie par filtration au gel est largement utilisée pour la séparation et la purification de macromolécules biologiques telles que les protéines et les peptides.tampon biologiqueLe BES joue un rôle indispensable.Puffer BESdans la chromatographie par filtration au gel.
Principes de base de la chromatographie par filtration au gel
Le principe de la chromatographie par filtration au gel repose principalement sur la diffusion et le dépistage des molécules dans les particules de gel.les molécules de différentes tailles seront bloquées à des degrés diversEn raison de son grand diamètre, les substances macromoléculaires ne sont pas faciles à pénétrer dans les pores des particules de gel, de sorte qu'elles se déplacent vers le bas le long de l'espace entre les particules de gel.la vitesse de migration est rapide, et le chemin est court, ils sortent donc d'abord de la colonne chromatographique; en plus de diffuser dans l'espace entre les particules de gel,Les petites molécules peuvent également pénétrer dans les micropores des particules de gelAu cours du mouvement vers le bas, de petites molécules diffusent d'une particule de gel à l'espace entre les particules et pénètrent ensuite dans une autre particule de gel.Ils pénètrent et diffusent constammentLa vitesse de déplacement vers le bas des petites molécules est inférieure à celle des grandes molécules, de sorte que les grandes molécules de l'échantillon sortent d'abord de la colonne chromatographique,les molécules moyennes sortent plus tard.Ce phénomène est également appelé phénomène de tamis moléculaire.
Caractéristiques tampons du BES et son rôle dans la chromatographie par filtration par gel
Le BES, en tant qu'agent tamponnant zwitterionique, présente d'excellentes performances de tamponnage et une biocompatibilité. Il peut absorber ou libérer efficacement des protons (H+) dans une large plage de pH (généralement 6,0 à 8,5),maintenant ainsi la stabilité relative du pH de la solutionCette caractéristique rend le BES un régulateur de pH idéal dans les expériences biochimiques.
Dans la chromatographie par filtration par gel, le rôle principal du BES est de maintenir la stabilité de la valeur du pH de la solution.En raison du fait que la fonction et l'activité de nombreuses biomolécules dépendent d'environnements pH spécifiques, il est essentiel de maintenir une valeur de pH stable de la solution pendant les processus de séparation et de purification.peut absorber ou libérer des protons pour faire face à de petits changements de pH dans la solution, assurant ainsi la stabilité et l'activité des biomolécules pendant le processus de séparation.
En outre, le BES peut également régler la résistance ionique de la solution.En ajustant la concentration de BES, la résistance ionique de la solution peut être contrôlée, ce qui affecte la vitesse d'élution et l'efficacité de séparation des protéines.Une résistance ionique appropriée peut améliorer l'interaction entre les particules de protéines et de gels, prolonge le temps d'élution des protéines et améliore l'efficacité de la séparation.
Application du BES dans la chromatographie par filtration au gel
1Optimiser les conditions de séparation
Lorsque la chromatographie par filtration par gel est utilisée pour séparer et purifier les biomacromolécules,il est nécessaire de choisir des conditions de séparation appropriées en fonction des caractéristiques des molécules cibles et des besoins expérimentaux.Le BES, en tant que solution tampon, peut optimiser les conditions de séparation en ajustant des paramètres tels que la concentration, la valeur du pH et la résistance ionique.l'augmentation de la concentration de BES et la réduction de la valeur du pH peuvent améliorer leur interaction avec les particules de gel et améliorer l'efficacité de séparation.
2Améliorer la pureté de la séparation
Étant donné que la chromatographie par filtration par gel est basée sur la taille moléculaire, il peut y avoir des molécules d'impuretés de taille similaire aux molécules cibles dans le processus de séparation.Ces molécules d'impuretés peuvent concurrencer les molécules cibles pour les sites d'adsorption des particules de gelEn utilisant le BES comme solution tampon, la résistance ionique et la valeur du pH de la solution peuvent être ajustées,afin de modifier l'interaction entre les molécules cibles et les molécules d'impuretés et les particules de gel et d'améliorer la pureté de séparation.
3. Protéger la structure et la fonction des biomolecules
Dans le processus de chromatographie par filtration par gel, la structure et la fonction des biomacromolécules peuvent être affectées par des facteurs physiques et chimiques.peut fournir un environnement pH stable et approprié pour protéger la structure et la fonction des biomolécules des effetsEn outre, le BES peut également se lier à certains ions métalliques pour former des complexes d'ions métalliques stables, évitant ainsi l'effet destructeur des ions métalliques sur les biomolécules.
Conclusion
En conclusion, le tampon biologique BES a une grande valeur d'application dans la chromatographie par filtration par gel.Les conditions de séparation peuvent être optimisées, l'efficacité et la pureté de la séparation peuvent être améliorées, et la structure et la fonction des biomolécules peuvent être protégées.
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