Application d'ester d'acridine en marquant l'acide nucléique

L'acridine ester (nsp-dmae-nhs), poudre jaune, numéro CAS: 194357-64-7, est un important réactif de chimioluminescence.les conditions d'étiquetage desacridine estersont légers, le taux d'étiquetage est élevé et l'étiquetage n'affecte pas la séparation.

En outre, le processus de chimioluminescence de l'ester d'acridine est rapide avec un faible fond, et peut émettre de la lumière en présence d'hydroxyde de sodium et de peroxyde d'hydrogène.Les réactifs de chimioluminescence à ester d'acridine ont une bonne stabilité et sont faciles à stocker.

En plus de l'application dans l'immuno-analyse, l'ester d'acridine peut également être utilisé pour étiqueter des sondes de fragments d'oligonucléotides pour la détection de gènes ou la détection microbienne.Les composés d'ester d'acridine conviennent à l'étiquetage des brins d'ADN pour fabriquer des sondes d'ADN à chimiluminescence.

Les résultats de la recherche médicale moderne montrent que de nombreuses maladies comme le cancer et les maladies génétiques sont liées à des mutations d'ADN, et de nombreuses maladies infectieuses sont causées par des virus,bactéries ou parasites dans l'environnementL'analyse de la séquence spécifique de l'ADN du virus est propice au contrôle de la situation épidémique.La détection de la séquence d'ADN et de la mutation de base dans son brin est d'une grande importance dans le dépistage des gènes, le diagnostic et le traitement précoces des maladies génétiques et la détection des gènes pathogènes.

Dans l'analyse de l'hybridation des acides nucléiques, la préparation d'une sonde spécifique et sensible est la clé du succès de l'analyse de l'hybridation des acides nucléiques.Les dérivés des esters d'acridine peuvent être étiquetés directement sur la sonde d'acide nucléique sans catalyseur et le rendement quantique de luminescence n'est pas affectéEn outre, dans certaines conditions, l'ester acridine marqué sur l'ADN à chaîne unique non hybride est hydrolysé et détruit,et seule la double chaîne formée par l'hybridation est protégée. Seul l'ester acridine peut produire la chimioluminescence., et l'ensemble du processus d'hybridation peut être surveillé sans séparation.

L'invention concerne une méthode d'étiquetage de l'acide nucléique à l'aide d'un ester d'acridine, qui comprend les étapes suivantes:

(1) Les extrémités 5' et 3' de la sonde ADN ont été protégées;

(2) Étiquetage des esters d'acridine: 25 mm d'ester d'acridine NHS ont été dissous dans le DMSO et 1 m de tampon HEPES (pH = 8,0) ont été préparés. Selon le rapport molaire de la sonde d'acide nucléique: ester d'acridine NHS = 1:5, il a été ajouté au tampon HEPES et réagi à 37 °C pendant 1 heure;

(3) Purifié par HPLC. Dans l'étape (1), la protection des extrémités 5' et 3' de la sonde ADN comprend spécifiquement:en utilisant de l'acétate de s-éthyle trifluorothio pour protéger l'extrémité 3'-nh 2.

Desheng technologie a été la recherche et le développementréactifs de chimioluminescenceAprès un développement réussi, il a été mis sur le marché et a gagné la reconnaissance générale des clients.Il y a du luminol et de l'isoluminol.La série des esters d'acridine a un rendement lumineux élevé et appartient à la luminescence directe.