4-hydroxyéthylpipérazine acide éthanosulfonique, abréviation anglaisePuffer HEPES, numéro CAS: 7365-45-9, couleur poudre cristalline blanche, pH 6,8-8.2, son utilisation la plus courante est comme tampon biologique pour ajuster la valeur du pH et son utilisation dans les produits de soin de la peau est également appréciée par les principaux fabricants.Son application dans la détection du virus de la rage est souvent inconnue.Aujourd'hui, le rédacteur en chef de Desheng popularisera les connaissances pertinentes pour tous.
Le virus de la rage ne produit généralement pas de cytopathie (CPE) lorsqu'il se reproduit dans des cellules infectées, et il n'est pas facile de former des plaques dans des conditions de culture conventionnelles.Bien que de nombreux chercheurs au pays et à l'étranger ont établi l'érosion du virus de la rage sur les cellules d'embryon de poulet et les cellules BHK-21Les méthodes spontanées, mais ces méthodes nécessitent des conditions expérimentales strictes, ou les opérations sont compliquées et difficiles à maîtriser, ce qui affecte leur popularisation et leur utilisation.Après que les chercheurs ont découvert que l'acide 4-hydroxyéthylpipérazine éthanesulfonique HEPES peut renforcer l'effet pathogène du virus de la rage sur les cellules infectées, ils ont utilisé cette caractéristique du HEPES pour établir une méthode de plaque HEPES simple et rapide pour le virus de la rage.
L'effet du HEPES sur la formation de plaque du virus de la rage
Après que les cellules infectées aient été cultivées à 37°C pendant 3 à 5 jours, les cellules infectées traitées par HEPES ont développé des modifications cytopathiques évidentes au fond du revêtement.Après avoir été teintée avec du cristal violetLa formation de plaque n' a pas été observée, tandis que le groupe de cellules infectées non traitées par HEPES n' a montré aucun signe de formation de plaque.On peut voir que le HEPES peut évidemment favoriser la formation de plaque du virus de la rage sur les cellules BHK..
Observation sur la sensibilité de la méthode HEPES pour la plaque
La méthode HEPES peut être utilisée pour le titre de l'infection virale.Des expériences montrent qu'il existe une relation de titre évidente entre le nombre de plaques formées après une infection virale et la dilution virale.Les titres infectieux de la même souche du virus de la rage CTN-BHK ont été mesurés par la méthode de la plaque HEPES et la méthode de la souris.Les résultats ont montré que le nombre de plaques obtenues par la méthode HEPES pour 4 déterminations consécutives variait de 1.0×10° à 4.0×10*PFU/m1. Le titre d'infection obtenu par la méthode de la souris pour 4 déterminations consécutives est de 6,0×6,8log ou 1,0×10°×6,3×10/ml.Cela montre que la méthode HEPES rapide de la plaque a la même sensibilité que la méthode murine..
Avantages de la méthode HEPES pour le traitement de la plaque
L'utilisation de la souche du virus de la rage CTN-181 et de la souche CTN-BNK pour étudier la méthode de titration du titre d'infection,les résultats montrent que le HEPES peut induire et renforcer l'effet pathogène du virus canin sur les cellules infectéesLorsque le virus infecte les cellules, elles sont cultivées à 37°C pendant 3°5 Il suffit d'ajouter 50°00mmol/L HEPES sur le couvercle du milieu semi-solide de méthylcellulose le premier jour,tache avec une solution cristalline violette après 24 heures, et calculer le nombre de plaques à l'œil nu après séchage à température ambiante.Cette méthode de plaque a les avantages de rapidement, simple, économique, sensible et facile à maîtriser.
Le HEPES produit par Desheng est de qualité réactif avec une pureté supérieure à 99%. Nos produits fonctionnent bien.DeshengSi vous avez des questions ou des besoins, vous pouvez aller sur le site officiel pour consulter le personnel du service à la clientèle.
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