L'ester d'acridine peut détecter des dommages d'ADN provoqués par le formaldéhyde et l'acétaldéhyde !

Divers facteurs exogènes et endogènes, tels que les polluants environnementaux, les rayonnements ionisants, la chimiothérapie médicamenteuse et le métabolisme cellulaire, peuvent provoquer diverses formes de dommages à l'ADN.Les ruptures de double brin d'ADN sont les plus graves dommages à la stabilité du génome et peuvent menacer la survie des cellules.L'établissement d'une méthode simple, rapide et sensible pour détecter les effets d'hybridation et de génotoxicité de l'ADN est un sujet de recherche très significatif.Voici une brève introduction à la méthode de détection des dommages à l'ADN.

Quels sont les types de détection des dommages à l'ADN

Les méthodes de détection des dommages à l'ADN comprennent l'électrophorèse au gel, la spectrophotométrie ultraviolette, la fluorescence et l'électrochimie, et l'analyse de la chimioluminescence.L'analyse de la chimioluminescence (CL) a été largement utilisée dans les domaines de l'environnement et des sciences de la vie en raison de sa grande sensibilitéLe formaldéhyde et l'acétaldéhyde sont tous deux des polluants environnementaux. Dans une certaine mesure, ils peuvent endommager l'ADN.Étudier la quantité d'esters d'acridinium incorporés dans l'ADN avant et après les dommages du formaldéhyde et de l'acétaldéhyde, provoquant des changements dans l'intensité de la chimioluminescence des esters d'acridinium, et étudier le comportement de dommages du formaldéhyde et de l'acétaldéhyde sur l'ADN.Mettre en place une méthode d'analyse de la chimioluminescence simple pour évaluer le degré de dommages à l'ADN causés par le formaldéhyde et l'acétaldéhyde.

Méthode des esters d'acridine pour détecter les dommages environnementaux à l'ADN

1Tout d'abord, la cellule luminescente en verre utilisée est trempée dans une certaine quantité d'acide nitrique concentré pendant plusieurs heures, acidifiée, puis rincée à l'eau.Ajouter 20 μL d'ADN du thymus du veau de 1 mg/mL à la cellule de luminescence acidifiée, et placez-le pendant 1 heure pour que l'ADN soit adsorbé au fond de la piscine émettrice de lumière,et puis l'ADN du thymus du veau non adsorbé est lavé avec de l'eau secondaire pour obtenir la piscine émettrice de lumière avec l'ADN adsorbé.

2. Ajouter 50 μl de 9,6×10-7 g/mlester d'acridiniumLa réaction de chimérisation est de 1h pour intégrer l'AE dans la structure à double brin d'ADN, et laver l'AE non chimérique avec de l'eau secondaire.dans la cellule luminescente Ajouter des réactifs d'initiation de la luminescence en séquence pour détecter la chimioluminescence générée par l'AE chimérisée dans l'ADNLorsque l'on détecte des dommages causés à l'ADN du thymus du veau par le formaldéhyde et l'acétaldéhyde, on ajoute un réactif de dommages à l'ADN après chimérisation AE et on l'utilise après une certaine période.La deuxième eau élimine l' AE libéré après l' ADN est endommagé, et le réactif d'initiation de la luminescence est ajouté pour détecter l'intensité de la chimioluminescence de l'AE chimérique dans l'ADN.

Des études ont montré que l'ester d'acridinium peut être utilisé comme indicateur de chimioluminescence avec une bonne structure d'intercalation de la double hélice d'ADN.Cette méthode de détection est réalisable pour les lésions de rupture de l'ADN et la méthode de détection par chimioluminescenceIl présente les avantages de la simplicité et de la sensibilité. Les études de dommages fournissent une méthode de recherche simple.stabilité thermique et rapport signal/bruit élevé, et les conditions d'étiquetage sont douces, le taux d'étiquetage est élevé, et la séparation n'affecte pas la séparation après étiquetage. , il est donc considéré comme un marqueur chimique idéal.