HEPES, acide ethanesulfonic de la pipérazine 4 hydroxyéthylique, utilise la réductibilité de HEPES aux métaux excédentaires aux valeurs du pH spécifiques, et emploie la méthode de la réduction HEPES-NaOH pour préparer des nanoparticles d'or. Cette méthode est simple pour utiliser, rapide pour réagir, facile à commander, moins de sous-produits, et de favorable à l'environnement.
Préparation des nanoparticles d'or
1. Préparez la solution acide chloroauric avec la concentration de 0.05-10 mmol/L ;
2. Préparez le tampon de HEPES avec la concentration de 5-50 mmol/L, et ajustez la valeur du pH Du tampon de HEPES sur 7.0-8.0 avec de l'hydroxyde de sodium ;
3. Ajoutez l'agent tensio-actif au tampon de HEPES prêt dans step2 pour préparer la solution d'agent tensio-actif avec une concentration de 1-2 mmol/L ;
4. La solution d'agent tensio-actif préparée dans step3 est présentée dans le réservoir de réaction, et la solution acide chloroauric préparée dans step1 est lentement ajoutée au réservoir de réaction selon le rapport molaire de la solution acide chloroauric et de la solution d'agent tensio-actif du 1h10 de 1:1-, et remuée à une vitesse de 200-300r/min. La réaction dure la minute 5-30 pour obtenir un mélange contenant des colloïdes de nanogold ;
5. Le mélange préparé dans step4 est séché et épuré pour obtenir des particules de nanogold.
Prenant le tampon de HEPES avec une concentration de 50 mmol/L comme exemple, la méthode de configuration est comme suit : premièrement, 2,38 kilogrammes de HEPES sont pesés et dissous dans 180 L de l'eau désionisée, et alors la valeur du pH de la solution est environ 5,4 à l'aide d'un compteur pH, puis 0,1 moles/l de solution d'hydroxyde de sodium sont ajoutées lentement et sans interruption remuées jusqu'à ce que le pH soit ajusté sur 7,4 ; en conclusion, l'eau désionisée est ajoutée à 200L.
Préparation de HEPES
Méthode 1
Utilisant le dichloroéthane 1,2 comme dissolvant, la pipérazine hydroxyéthylique (5.00g, 0.02mol), le carbonate de potassium K2 Co3 (6.00g, 0.04mol), le dichloroéthane 50mL 1,2 ont été ajoutées dans une bouteille du trois-port 100mL équipée du stirring mécanique et du thermomètre. Le bain d'huile a été chauffé à 90℃ (point d'ébullition 1,2-dichloroethane 85℃), et la réaction a été remuée pour 20h.Stop la réaction, filtre et lave le sel filtré avec 200 ml d'acétate éthylique (EA). Le filtrat a été séché pour obtenir 2,6 le solide de g HEPES.
Méthode 2
le sulfite de sodium 11.0g (84.5mmol) anhydre, 27,0 ml (343.6mmol) de dichloroéthane, 120mL l'eau, 110mL l'éthanol, la poudre 50mg de cuivre ont été ajoutés dans trois bouteilles avec l'agitateur et le tube magnétiques de condensation de reflux à leur tour. Le bain d'huile a été chauffé et chauffé pour chauffer au reflux. Après reflux pour 22h, le liquide de réaction a été évaporé à pression réduite pour enlever l'eau jusqu'à ce que tous les solides blancs aient été précipités. Ce solide se compose principalement de produits, de matières premières non réagies et de sel produits. Le solide et l'éthanol 500mL obtenus ont été ajoutés dans un flacon 1L et chauffés pour le reflux pour 40min.Drain et filtre tandis que chauds, et laissez le filtrat le refroidissent, puis laissent à 0℃ durant la nuit. Le séchage de filtration et sous vide de drainage a eu comme conséquence la cristallisation de flocon avec le rendement de 11,40 g et le rendement de 81,0%.
Le sulfonate chloroéthylique de sodium (15,10 g, 0,08 moles), la pipérazine hydroxyéthylique (9,88 g, 0,075 moles), 60 ml d'eau et le bain d'huile ont été ajoutés dans quatre flacons avec l'agitateur, le tube de condensation de reflux et le thermomètre magnétiques pour remuer la réaction à 105℃. Pendant que la réaction procédait, le pH de la solution de réaction diminuerait, et le soluté de 5 moles/LNaOH a été ajouté goutte-à-goutte pour commander le pH à environ que 9. un total de 15 ml ont été ajoutés et la réaction a continué pour 5h.
À la fin de la réaction, la solution de réaction a été diluée à 500mL avec de l'eau, et la colonne d'échange ionique supérieure de résine (au sujet de 500g) a été dessalée et épurée. Après que la solution de réaction ait été tout chargée sur la colonne, elle a été lavée avec de l'eau distillée jusqu'à ce que l'effluent pH ait été 6, et puis a été lavée avec de l'eau ammoniaque 1mol/L. L'effluent avec les points de produit (pH environ 5-9) a été rassemblé pour la détection de chromatographie sur couche mince. L'évaporation rotatoire a été concentrée à 150 ml, décoloration de charbon actif a été ajoutée, bain d'huile était 110℃, chauffage et le stirring pour 0.5h, la filtration, séchage rotatoire de filtrat, ajoutant l'éthanol 50mL, chauffant le reflux pour 0,5 h, filtration thermique, le solide blanc obtenu après le séchage était le filtrat 8.63G.The a été égoutté avec de l'acide acétique glaciaire, ajusté sur pH 5, du jour au lendemain refroidi à 0℃, et filtré. Le solide obtenu était 2.80G après séchage. Un total de 11.43g de solide de HEPES a été obtenu en rendement 64,5%.
La méthode de préparation de tampon de 10mmol/L HEPES est comme suit : pesez 2.383g de HEPES exactement, ajoutez l'eau trois-cuite à la vapeur fraîche au volume constant à 1 stérilisation de L.Filtration, stockage à 4℃ après le sous-emballage. Si utilisé comme tampon une fois ajouté au milieu de culture cellulaire, on lui recommande que le milieu de culture soit gardé à partir de la lumière.
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