L'ester d'acridine peut détecter des dommages d'ADN provoqués par le formaldéhyde et l'acétaldéhyde !

Les divers facteurs exogènes et endogènes, tels que les polluants environnementaux, les rayonnements ionisants, chimiothérapie de drogue, et métabolisme de cellules, peuvent causer de diverses formes de dommages d'ADN. Parmi eux, les coupures de double-brin d'ADN ont la plupart de sérieux dommages à la stabilité de génome et peuvent menacer la survie des cellules. Établissant un simple, la méthode rapide et sensible pour détecter des effets d'hybridation et de génotoxicité d'ADN est un domaine de recherche très signicatif. Voici une brève introduction à la méthode de détection de dommages d'ADN.

Ce qui sont les types de détection de dommages d'ADN

Les méthodes de dépistage de dommages d'ADN incluent la spectrophotométrie d'électrophorèse de gel et ultra-violette, la fluorescence et l'électrochimie, et l'analyse de chimiluminescence. L'analyse de chimiluminescence (CL) a été très utilisée dans les domaines de l'environnement et des sciences de la vie dus à sa sensibilité élevée, le grand choix linéaire, l'opération commode, l'analyse rapide, et l'automation facile. Le formaldéhyde et l'acétaldéhyde sont les deux polluants environnementaux. Dans une certaine mesure, elle peut endommager ADN. Étudiez la quantité d'esters d'acridinium incorporés en ADN avant et après les dommages du formaldéhyde et de l'acétaldéhyde, causant des changements de l'intensité de chimiluminescence des esters d'acridinium, et étudiez le comportement de dommages du formaldéhyde et de l'acétaldéhyde sur l'ADN. Établissez une méthode d'analyse simple de chimiluminescence pour évaluer le degré de dommages d'ADN provoqué par le formaldéhyde et l'acétaldéhyde.

Méthode d'esters d'acridine pour détecter le dommage causé à l'environnement à l'ADN

1. D'abord, imbibez la cellule en verre de luminescence utilisée en un acide nitrique concentré pendant plusieurs heures, acidifiez, et puis la rincez avec de l'eau. Ajoutez le μL 20 de l'ADN de thymus du veau 1mg/mL à la cellule acidifiée de luminescence, et placez-le pour que 1 heure prépare L'ADN est adsorbé sur le fond de la piscine luminescente, et puis le veau unadsorbed que l'ADN de thymus est lavée avec de l'eau secondaire pour obtenir la piscine luminescente avec de l'ADN a adsorbé.

2. Ajoutez 50μL d'ester de l'acridinium 9.6×10-7g/mL à la cellule luminescente, et la réaction de chimerization est pour que 1h enfonce les EA dans la structure bicaténaire d'ADN, et enlève les EA unchimeric avec de l'eau secondaire. En conclusion, dans la cellule luminescente ajoutez les réactifs d'initiation de luminescence dans l'ordre pour détecter la chimiluminescence produite par les EA chimerized en ADN. En détectant les dommages de l'ADN de thymus de veau par le formaldéhyde et l'acétaldéhyde, ajoutez le réactif de dommages à l'ADN après chimerization des EA, et employez-le après une certaine période. La deuxième eau enlève les EA libérés après que l'ADN soit endommagée, et le réactif d'initiation de luminescence est ajouté pour détecter l'intensité de chimiluminescence des EA chimériques dans l'ADN.

Les études ont prouvé que l'ester d'acridinium peut être employé comme indicateur de chimiluminescence avec une bonne structure d'intercaler la double hélice d'ADN. Cette méthode de dépistage est faisable pour des dommages de coupure d'ADN et la méthode de dépistage de chimiluminescence. Elle a les avantages de la simplicité et de la sensibilité. Les études de dommages fournissent une méthode de recherche simple. Les marqueurs luminescents d'ester d'acridine de Desheng ont les propriétés de la bonne stabilité hydrolytique, de la stabilité thermique et du rapport signal/bruit élevé, et les conditions de étiquetage sont douces, le taux de étiquetage est haut, et la séparation n'affecte pas la séparation après étiquetage. , Ainsi on le considère un marqueur chimique idéal.