Wuhan Desheng Biochemical Technology Co., Ltd

In biochemical experiments, CAPS buffer, as an important alkaline buffer, is widely used in Western blotting, enzyme catalyzed reactions, and HPLC separation due to its stable pKa value (about 10.4), good water solubility (up to 11.07 mg/mL at 25 ℃), and low cell membrane permeability. However, experimenters often find that the solubility of CAPS significantly decreases at low temperatures (such as 4 ℃ or -20 ℃), leading to difficulties in buffer preparation or uneven concentration, which in turn affects the reliability of experimental results. This article will analyze this phenomenon from three levels: molecular mechanisms, environmental factors, and experimental operations, and propose targeted optimization solutions. Molecular mechanism of low temperature solubility decrease The dissolution process of CAPS is essentially the process of its molecules forming a hydration layer with water molecules through hydrogen bonding. At room temperature, the sulfonic acid group (- SO3H) and amino group (- NH -) in CAPS molecules combine with water molecules through polar interactions to form stable solute solvent complexes. However, as the temperature decreases, the thermal motion of water molecules weakens, and the hydrogen bonding network tends to become rigid, resulting in a decrease in the binding energy between CAPS molecules and water molecules. Experimental data shows that the solubility of CAPS decreases by about 30% at 4 ℃ compared to 25 ℃, which is closely related to changes in the dynamic properties of water molecules. In addition, the crystallization behavior of CAPS undergoes significant changes at low temperatures. At room temperature, CAPS molecules are dispersed in a disordered state in solution; When the temperature drops below the critical point, molecules form an ordered lattice structure through hydrophobic interactions and π - π stacking. This phase transition process will further reduce the solubility of CAPS and even lead to the precipitation of undissolved solid particles. For example, when preparing CAPS buffer solution, if the solvent is not sufficiently preheated, white flocculent precipitates can often be observed, which is a direct manifestation of low-temperature induced crystallization. The synergistic effect of environmental factors on solubility In solvent ion strength experiments, deionized water is often used to prepare CAPS buffer solution. However, if there are residual metal ions (such as Ca ² ⁺, Mg ² ⁺) in the water, they will form complexes with the sulfonic acid groups in CAPS molecules, reducing their effective solubility. At low temperatures, the hydration of ions is enhanced, the stability of the complex is improved, and further exacerbating the decrease in solubility. For example, in a solution containing 0.1 mM Ca ² ⁺, the solubility of CAPS at 4 ℃ is reduced by 15% compared to pure water system. The solubility of CAPS is closely related to its dissociation state due to pH fluctuations. When the pH is below pKa (10.4), CAPS molecules exist in protonated form (- SO3H) with high solubility; When the pH approaches or exceeds pKa, the solubility of the deprotonated form (- SO ∝⁻) significantly decreases. Under low temperature conditions, the pH value of the buffer solution may drift due to the dissolution of CO ₂ or hydrolysis of impurities, indirectly affecting the dissolution behavior of CAPS. By understanding the molecular mechanism and environmental factors that contribute to the decrease in low-temperature solubility of CAPS, researchers can optimize the preparation process and storage conditions in a targeted manner to ensure the stability of the buffer performance. In the future, with the development of new zwitterionic buffering agents, the limitations of CAPS in low-temperature experiments are expected to be fundamentally resolved. As a professional biological buffering agent manufacturer, Desheng is committed to providing high-quality CAPS buffering agents. We not only have professional personnel to supervise and control the process from raw material use to factory preparation, but also continuously optimize testing methods to meet the diverse needs of our customers. There is stock available for sale in the warehouse at a cheap price. If you have any relevant intentions, please feel free to click on the website to inquire about details and purchase at any time!

Dans les cultures cellulaires et les expériences biologiques,Puffer HEPESLe premier est utilisé pour maintenir la stabilité du pH dans le milieu de culture, tandis que le second est utilisé pour afficher visuellement les changements de pH.l'interaction entre les deux en termes de propriétés chimiques peut entraîner des anomalies de couleurCet article analysera les causes de ce phénomène et fournira des solutions d'optimisation simplifiées. Base chimique de l'interférence de couleur Le rouge phénolique est un colorant sensible au pH qui change de couleur en fonction de l'acidité ou de l'alcalinité: il apparaît jaune dans les environnements acides (pH < 6,8), rouge dans les environnements neutres (pH ≈ 7,4),et rouge violet dans les environnements alcalins (pH> 8Cette caractéristique en fait un outil idéal pour la surveillance du pH des milieux de culture cellulaire. La fonction principale du HEPES en tant que tampon est de stabiliser le pH en libérant ou en absorbant des ions hydrogène.Le problème est que les groupes d'acide sulfonique dans les molécules HEPES ont une structure chimique similaire à celle du phénol rouge, et lorsque la concentration de HEPES est élevée, ils interagissent avec le phénol rouge pour modifier sa structure moléculaire.Ce changement provoque la couleur du phénol rouge pour devenir plus claire ou le changement à un pH spécifique, par exemple, il peut apparaître rouge orange au lieu du rouge standard à pH 7.4. La manifestation intuitive du phénomène d'interférence En culture cellulaire conventionnelle, si des concentrations élevées d'HEPES (par exemple supérieures à 20 mmol/L) et de phénol rouge sont utilisées simultanément, la couleur du milieu de culture peut être plus claire ou jaunâtre que prévu..Par exemple, le milieu de culture au pH 7,4 qui aurait dû apparaître en rouge a peut-être pris un orange pâle en raison de l'interférence du HEPES, ce qui a conduit les chercheurs à juger à tort la valeur du pH. Dans l'observation par microscopie à fluorescence, cette interférence est plus prononcée.entraînant une diminution de la luminosité de l'image ou une augmentation du bruit de fondCet effet est particulièrement important dans les expériences d'observation à long terme ou d'imagerie de cellules vivantes, qui peuvent masquer le véritable état des cellules. Plan d'optimisation simplifié Ajustez la concentration de HEPES 1La culture conventionnelle: contrôler la concentration de HEPES dans les 10 à 15 mmol/L, ce qui a une interférence minimale avec le développement de la couleur du rouge phénol et peut maintenir efficacement la stabilité du pH. 2Expérience à court terme: si la durée de l'expérience est courte (par exemple < 4 heures), la concentration de HEPES peut être réduite à 5 mmol/l ou ajoutée uniquement en cas de besoin. 3. Cellules sensibles: pour les cellules extrêmement sensibles aux changements de pH (tels que les neurones), il est recommandé d' utiliser un système tampon au bicarbonate au lieu de HEPES ou d' éliminer complètement le phénol rouge. Méthodes de rendu des couleurs alternatives 1. milieu de culture sans phénol rouge: pour les expériences nécessitant des concentrations élevées de HEPES, un milieu de culture sans phénol rouge peut être sélectionné,et des bandelettes de test de pH ou des pH-mètre électroniques peuvent être utilisés pour surveiller l'acidité et l'alcalinité. 2Les sondes fluorescentes: en utilisant des colorants fluorescents tels que BCECF-AM au lieu du rouge phénol, ces sondes ne sont pas affectées par l'interférence HEPES et peuvent fournir des mesures de pH plus précises. 3. Correction de la couleur: si l'HEPES et le rouge phénol doivent être utilisés simultanément, une courbe standard peut être préparée à l'avance pour corriger l'écart de couleur observé par la méthode colorimétrique. Optimisation de la conception expérimentale 1. tamponnage par étapes: utiliser HEPES pour maintenir le pH pendant la phase de pré- culture des cellules, et passer à un milieu de culture sans HEPES avant l'imagerie pour réduire les interférences. 2. Sélection des longueurs d'onde: dans l'imagerie par fluorescence,éviter la longueur d'onde d'absorption principale du rouge phénol (comme 560 nm) et choisir un canal de fluorescence de longueur d'onde plus longue (comme 633 nm) pour réduire les interférences de fond. 3. réglage de contrôle: un groupe de contrôle sans HEPES a été mis en place pour chaque expérience afin de comparer visuellement les différences de couleur. En comprenant le mécanisme d'interaction entre le HEPES et le phénol rouge,Les chercheurs peuvent facilement ajuster les conditions expérimentales pour assurer la fiabilité des résultats de développement des couleurs tout en maintenant la stabilité du système de culturePour les expériences complexes, il est recommandé de réaliser d'abord des expériences préliminaires à petite échelle pour vérifier l'efficacité du schéma d'optimisation. Hubei Xindesheng Material Technology est spécialisée dans la production de HEPES et autresagents de tamponnage biologiquesLes produits ont une haute pureté, une bonne capacité de tamponnage, et des prix abordables, fournissant un soutien du produit pour les expériences connexes.N'hésitez pas à me contacter.!

Dans l'utilisation dele nouveau réactif de Trinder TODB, le fond élevé est un problème courant qui affecte les résultats de détection, tandis que l'étanchéité insuffisante et le lavage incomplet des plaques sont des facteurs clés facilement négligés pendant le fonctionnement.Ces deux problèmes peuvent provoquer une augmentation anormale de la couleur de fond due à la liaison non spécifique et à l'interférence des substances résiduelles.Vous trouverez ci-dessous une analyse détaillée et une solution. Fermeture insuffisante: force motrice "derrière les coulisses" derrière des combinaisons non spécifiques La fonction de l'étape de blocage est de bloquer les sites non liant à la surface du support de réaction (comme une plaque d'essai d'immunosorbent liée à l'enzyme).les substrats, des conjugués enzymatiques et d'autres composants du réactif TODB s'adsorberont aléatoirement sur la surface du support, formant un signal de couleur sans la participation de la substance cible,augmentation directe de la valeur de fond. raison spécifique 1- Temps d'étanchéité insuffisant: en général, l'étanchéité nécessite une position à 37 °C pendant 60 minutes ou à température ambiante pendant 120 minutes.les sites actifs à la surface du support ne peuvent pas être complètement couverts par la solution de blocage (par exemple BSA), la poudre de lait écrémé), et les zones hydrophobes qui ne sont pas bloquées adsorberont activement les composants protéiques dans le système de réaction TODB, ce qui entraînera une coloration de fond. 2. trop faible concentration de solution de blocage: lorsque les ingrédients efficaces de la solution de blocage sont insuffisants, par exemple lorsque la concentration initiale de 5% d' ASB tombe à 1%,un film protecteur étroit ne peut pas se former entre les moléculesLes composants tels que la peroxidase du raifort dans le réactif TODB s'attacheront à la paroi interne du pore de la plaque par des interactions hydrophobes.et des réactions non spécifiques se produiront avec le substrat pendant la réaction. 3- défaillance de la solution étanche: si la solution étanche est congelée et fondue à plusieurs reprises, ou stockée plus longtemps que sa date de péremption,les composants protéiques à l'intérieur se détérioreront et perdront leur fonction de scellement, résultant en de nombreux sites "exposés" sur la surface du support, qui deviennent la source de signaux de fond. Le lavage incomplet du carton: l'"effet d'empilement" des substances résiduelles La fonction principale du lavage des assiettes est d'éliminer les réactifs libres non liés (tels que les anticorps non liés, les substances précurseurs de TODB).Les substances résiduelles continueront à participer au développement de la couleur dans les réactions ultérieures., permettant l'accumulation d'interférences de fond. Raison spécifique 1. Trop peu de lavages de plaques: les essais conventionnels nécessitent de laver la plaque 3 à 5 fois.et la réaction va réagir avec le substrat TODB, ce qui entraîne un développement supplémentaire de la couleur. 2. Trop de résidus de détergent: après le lavage de la planche, si les trous sur le papier absorbant ne sont pas inversés et secs, il y aura plus de résidus de détergent dans chaque trou,et certains composants à l'intérieur perturberont l'équilibre du système de réaction TODBDans le même temps, les conjugués enzymatiques résiduels se diffuseront dans les trous adjacents avec le liquide, provoquant une contamination croisée et soulevant le fond. 3. il y a un problème avec la machine à laver: lorsque l'aiguille de la machine à laver est bloquée ou que la pression est insuffisante,les coins des trous de la plaque deviendront des zones qui ne peuvent pas être lavésLe réactif TODB résiduel se cristallise après séchage et participe à la réaction lorsqu'il est à nouveau dissous, ce qui entraîne un assombrissement de la couleur du fond local. Résumé: Les détails opérationnels déterminent l'efficacité du contrôle de fond Bien que l'étanchéité et le lavage des plaques soient des étapes de routine, leur qualité affecte directement le niveau de fond des réactifs TODB.il est recommandé d'adopter la méthode de "prolongation du temps d'étanchéité+augmentation du nombre de lavages de plaques", combinée à des mesures telles que la vérification de la concentration de la solution d'étanchéité et l'étalonnage régulier de la machine à laver,qui peuvent réduire de manière significative la valeur de fond et assurer l'exactitude des résultats de détection. Desheng est spécialisée dans la production de plus de dix nouveaux réactifs de Trinder, dont TODB.il peut s'assurer que TODB apparaît sous forme de poudre d'une pureté allant jusqu'à 990,5%, forte solubilité dans l'eau et performances stables pour assurer l'exactitude des résultats expérimentaux.Desheng a une place sur le marché des matières premières des kits de diagnostic in vitro avec des produits de haute qualitéSi vous avez des intentions pertinentes, veuillez cliquer sur le site officiel pour consulter!  

Dans le domaine de la détection biochimique, le choix des colorants joue un rôle crucial dans la sensibilité, la précision et la stabilité des méthodes de détection. Actuellement, il existe différents types de colorants sur le marché, tels que le TMB largement utilisé dans le test immuno-enzymatique (ELISA), qui est devenu un choix courant pour de nombreux scénarios de détection en raison de sa large applicabilité. Cependant, dans la détection d'indicateurs spécifiques, le nouveau réactif de Trinder a démontré des performances uniques et excellentes, avec le réactif TOPS montrant des avantages significatifs dans la détermination des acides gras. Avantages exceptionnels en termes de sensibilité et de précision En détection biologique, la sensibilité et la précision sont les indicateurs clés pour mesurer la qualité des méthodes de détection. Lors de l'utilisation du réactif TOPS pour déterminer les acides gras libres (AGL) sériques, sa sensibilité est extrêmement excellente. La teneur en acides gras libres sériques dans le corps est relativement faible, et même de faibles variations de leur concentration peuvent être étroitement liées à divers états physiologiques et pathologiques. Les réactifs TOPS peuvent capturer avec précision ces changements de concentration subtils, et même de faibles concentrations d'acides gras libres sériques peuvent être détectées efficacement, fournissant un soutien de données plus précis pour le diagnostic clinique et la recherche. Parallèlement, les réactifs TOPS sont également précis. Pendant le processus de détection, ils peuvent minimiser l'influence des facteurs interférents et garantir que les résultats de la détection reflètent fidèlement et de manière fiable la teneur en acides gras libres dans le sérum. Comparés à certains colorants traditionnels, les résultats de détection du réactif TOPS ont une répétabilité et une cohérence plus élevées, évitant efficacement les erreurs causées par les propriétés instables des colorants, et fournissant une base solide pour la recherche scientifique et la prise de décision clinique. Opération facile et pratique En plus d'une sensibilité et d'une précision élevées, la facilité d'utilisation est également un point fort majeur des réactifs TOPS. Dans les tests pratiques, la méthode d'utilisation de TOPS comme substrat chromogène pour détecter les AGL sériques ou plasmatiques est relativement simple en termes d'étapes, sans nécessiter d'équipement instrumental complexe ni de procédures opératoires fastidieuses. Les chercheurs ou le personnel de laboratoire clinique n'ont qu'à suivre les directives standard d'opération expérimentale, mélanger l'échantillon avec les réactifs TOPS et les réactifs associés, et après un temps de réaction approprié, le détecter à l'aide d'instruments conventionnels tels que des spectrophotomètres. Cette méthode d'opération simple et pratique améliore non seulement l'efficacité de la détection et réduit les coûts expérimentaux, mais réduit également les erreurs causées par les erreurs opérationnelles, rendant les résultats de la détection plus fiables. Excellentes performances dans de multiples normes Parmi de nombreux colorants de Trinder, le réactif TOPS se distingue sur plusieurs indicateurs de performance clés. Deuxièmement, les réactifs TOPS ont une grande stabilité. Pendant le stockage et l'utilisation, ils ne se décomposent pas ou ne se détériorent pas facilement, et peuvent maintenir leur stabilité chimique pendant une longue période, offrant une assurance fiable pour la détection. De plus, l'absorptivité molaire du réactif TOPS est élevée, ce qui signifie qu'il a une forte capacité d'absorption de la lumière et peut produire des changements de couleur significatifs à des concentrations plus faibles, améliorant ainsi la sensibilité et la limite de détection de la détection. En résumé, le nouveau réactif de Trinder TOPS présente des avantages significatifs dans la détermination des acides gras, tels qu'une sensibilité élevée, une bonne précision, une opération simple et pratique, et d'excellents indicateurs de performance. Avec le développement continu de la technologie de détection biologique, les réactifs TOPS devraient jouer un rôle plus important dans le domaine de la détection des acides gras, fournissant un soutien plus fort à la recherche en sciences de la vie et au diagnostic clinique. Desheng est spécialisé dans la production de plus de les nouveaux réactifs de Trinder, y compris TOPS. Après plus de dix ans de recherche et développement, il peut garantir que TOPS se présente sous forme de poudre avec une pureté allant jusqu'à 99,5 %, une forte solubilité dans l'eau et des performances stables pour assurer la précision des résultats expérimentaux. Desheng a une place sur le marché des matières premières de kits de diagnostic in vitro avec des produits de haute qualité, et est profondément apprécié et soutenu par les clients nationaux et étrangers. Si vous avez des intentions pertinentes, veuillez cliquer sur le site officiel pour une consultation !