Catégorie cosmétique CAS de préparation enzymatique d'estérase de cholestérol AUCUN 9026-00-0

L'estérase de cholestérol catalyse l'hydrolyse des esters de stérol dans leurs stérols composants et acides gras. L'enzyme est trouvée principalement dans le pancréas, mais a été aussi bien détectée dans d'autres tissus. Des sels de bile, tels que le cholate et ses conjugués, sont exigés pour stabiliser l'enzyme sous sa forme polymère indigène et pour la protéger contre l'hydrolyse protéolytique dans l'intestin (Vahouny et Treadwell 1968). L'estérase de cholestérol trouve des applications cliniques dans la détermination du cholestérol dans le sérum (Allain et autres 1974).

Histoire :

Tout au long des années 1900 tôt la synthèse et l'hydrolyse enzymatiquement catalysées des esters de cholestérol en présence de certains tissus ont été observées et décrites (Kondo 1910, Schultz 1912, Cytronberg 1912, Gardner et Lander 1913, Mueller 1916, portier 1916, Nomura 1924, Shope 1928, Nedswedski 1935, Klein 1939, Sperry 1935, et Sperry et Stoyanoff 1937).

En 1949 et 1950, deux documents ont été édités en tant qu'élément d'une étude étendue sur l'estérase de cholestérol. Cette recherche a décrit une méthode pour la préparation enzymatique brute qui s'est concentrée sur l'importance des émulsions stables du cholestérol et les esters de cholestérol pour l'activité (Yamamoto et autres 1949, et la bosse et le Treadwell 1950). Tout au long des années 1950, l'estérase de cholestérol du sérum et de divers autres tissus ont été étudiés (Korzenovsky 1960). En 1957, Hernandez et Chaikoff ont étudié les propriétés de l'estérase pancréatique de cholestérol spécifiquement et ont conçu une méthode turbidimétrique rapide pour l'évaluation enzymatique d'activité (Hernandez et Chaikoff 1957).

Pendant les années 1960, Vahouny a et autres étudié des méthodes pour protéger l'estérase de cholestérol contre l'inactivation protéolytique (Vahouny et autres 1964). Cette étude ajoutée à la corrélation connue entre la maladie cardio-vasculaire et le haut cholestérol dans le sérum (clés 1980, et le Goldstein et le Brown 2003) a mené à l'élaboration des méthodes totales de détermination de cholestérol dans le sérum utilisant l'estérase de cholestérol (Allain et autres 1974).

En 1989, Kyger a et autres ordonnancé un clone de cDNA d'estérase pancréatique bovine de cholestérol. En 1994, étude du point de repère la « 4S » a montré que pour la première fois cela abaissant des niveaux de LDL par l'utilisation des statins pourrait empêcher des crises cardiaques et prolonger la vie (Goldstein et Brown 2003). Avec de telles options de traitement disponibles et le besoin d'examiner le cholestérol total en sérum se levant nettement, l'estérase de cholestérol a devenu des enzymes les plus très utilisées dans les laboratoires cliniques (MacLachlan 2000).

Spécificité :

L'estérase de cholestérol est synthétisée dans les cellules acinaires du pancréas, stockée en granules de zymogène, et sécrétée comme composant de jus pancréatique dans le lumen de l'intestin grêle (Labow et al.1983). L'estérase de cholestérol hydrolyse un large éventail de substrats d'ester comprenant des esters de cholestéryle, des acylglycerides, des phospholipides (Brockerhoff et Jensen 1974), des esters de retinyl (Fredrikzon et autres 1978), des esters de vitamine, et des esters phényliques (Rudd et Brockman 1984). L'enzyme s'est également avérée pour avoir l'activité d'amidase (Hui et autres 1993). L'enzyme est utile comme biocatalyseur en raison de sa capacité de catalyser des réactions de transacylation dans un environnement eau-limité (Gallo et autres 1977, Kazlauskas 1989, et Feaster et autres 1996).

Caractéristiques moléculaires :

Le gène qui code l'estérase de cholestérol chez les porcs (lipA) est situé sur le chromosome 14 (identification de GÈNE : 100142668). Le gène de LIPA est conservé dans l'humain, chimpanzé, chien, vache, souris, rat, poulet, zebrafish, mouche à fruit, moustique, elegans de C., le pombe de S., S. cerevisiae, gossypii d'E., grisea de M., cassa de N., thaliana d'A., et riz.

Composition :

L'estérase de cholestérol est une glycoprotéine qui en présence des agrégats de sels à un hexamer (Hyun et autres 1971). L'estérase de cholestérol appartient à la famille de pli d'alpha/bêta-hydrolase (Ollis et autres 1992, et à Cygler et autres 1993). La plupart des membres de cette famille sont des estérases et partagent les caractéristiques secondaires et tertiaires. Presque tous emploient un mécanisme catalytique d'estérase de sérine, qui ressemble à cela des protéases de sérine (Kraut 1977).

Numéro d'accession de protéine : NP_001116606

Poids moléculaire :

• Monomère : kDa 65 (Hyun et autres 1971)
• Monomère : kDa 43,3 (théorique)
• Hexamer : kDa 400 (Hyun et autres 1971)

PH optimal :

• Pour l'estérification, 6.1-6.2 (Vahouny et Treadwell 1968)
• Pour l'hydrolyse, 6.6-7.0 (Vahouny et Treadwell 1968)

Point isoélectrique :

• 7,91 (théorique)

Coefficient d'extinction :

• 86 680 cm^-1 M^-1 (théorique)
• E_1%,280 = 20,01 (théorique)

Résidus actifs de site :

• Sérine (S194)
• Histidine (H435)
• Aspartate (D320)

Activateurs :

• Sels de bile
• Cholate (Vahouny et autres 1964)
• Glycocholate (Vahouny et autres 1964)
• Taurocholate (Vahouny et autres 1964)

Inhibiteurs :

• PMSF et p-chloromercuribenzoate (Hyun et autres 1971, et Vahouny et autres 1964)
• Fluorophosphate diisopropylique (Momsen et Brockman 1976)
• Hectogramme²⁺, AG ⁺, et détergents ioniques
• Carbamates aryliques (Feaster et autres 1996)

Applications :

• Détermination de cholestérol dans le sérum et le plasma, avec de l'oxydase de cholestérol ou la peroxydase
• Synthèse des alcools optiquement actifs et des acides carboxyliques (par l'intermédiaire de l'hydrolyse, de l'estérification, ou de la transestérification d'ester)