Vous devriez connaître cette connaissance au sujet de trypsine porcine

Ce qui est trypsine

La trypsine (C6H15O12P3) est un genre de protéase. Dans les vertébrés, elle fonctionne comme enzyme digestive. Dans le pancréas, elle est synthétisée comme précurseur de l'enzyme trypsinogen. Elle est sécrétée comme composant de jus pancréatique et décomposée en trypsine activée sous la restriction de l'enterokinase ou de la trypsine. C'est une endopeptidase qui peut couper le côté carboxylique des résidus de lysine et d'arginine dans la chaîne de polypeptide. Il fonctionne non seulement comme enzyme digestive, mais limite également la décomposition des précurseurs d'autres enzymes telles que le chymotrypsinogen, le carboxypeptidase, et la phospholipase, et a un effet de déclenchement. C'est la protéase la plus spécifique, et c'est devenu un outil indispensable en déterminant la séquence des acides aminés d'une protéine.

Introduction de trypsine porcine

La masse moléculaire relative de trypsinogen porcin est environ 24 000. Selon la différence au point isoélectrique, trypsinogen porcin peut être divisé en anionique (pl6.8<6>). Puisque le type cationique a non seulement une plus grande densité, mais a également une meilleure stabilité que le type anionique, le trypsinogen porcin cationique a été choisi pour la construction et l'expression. Trypsinogen porcin contient 12 cystéines, qui peuvent former 6 paires de liaisons disulfide (30-160, 48-64, 132-233, 139-206, 171-185, 196-220), qui ont considérablement augmenté la difficulté de la dénaturation et la renaturation d'acide nucléique des corps d'inclusion dans des expériences suivantes.

Application de trypsine porcine

La trypsine porcine est un genre de trypsine, qui peut être employé comme additif pour le retrait des cellules adhérentes extérieures, la production des vaccins de virus de la grippe, insuline et d'autres protéines, l'hydrolyse rapide des protéines, et le traitement préparatoire des cellules et des tissus animaux. Il y a une grande demande de trypsine avec la grande pureté et l'activité forte. Actuellement, un procédé de préparation de trypsinogen porcin de recombinaison a été établi, et la trypsine porcine de recombinaison obtenue a la bonne activité enzymatique et ne contient pas l'autre pollution animale de source, qui constitue une certaine base expérimentale pour la recherche et la production industrialisées.

Caractéristiques de trypsine porcine

La trypsine porcine est instable dans la nature et à l'autolyse encline. En construisant un système trypsinogen porcin de recombinaison d'expression, cette caractéristique d'autolyse le rend difficile pour que le système eucaryotique d'expression obtienne trypsinogen complet, et le produit activé affecteront le centre serveur. Les cellules peuvent également être toxiques, ainsi envisagez de choisir un système procaryotique d'expression. En outre, les caractéristiques d'autolyse exigent de que les conditions d'activation de trypsinogen porcin aussi de devoir être strictement commandées.

Méthode de préparation de trypsine porcine

Dans la méthode traditionnelle de préparation, il y a beaucoup des étapes de séparation et de purification et un long temps, qui est facile d'endommager la protéine et l'inactivation de cause. Ayant pour résultat le bas rendement. Par conséquent, la préparation et la production de la trypsine porcine a graduellement décalé de l'extraction à partir du pancréas animal à la production de recombinaison d'expression. La production de la trypsine en construisant un système trypsinogen-dérivé porcin de recombinaison d'expression d'Escherichia coli peut également éviter le risque de contamination relative d'agent pathogène et le risque d'être porteur des virus inconnus dus à l'origine animale du donateur.