Le nom et prénoms de HEPES est acide ethanesulfonic du hydroxyethylpiperazine 4, CAS est 7365-45-9, HEPES est employé souvent dans des tampons biologiques, gamme de tampon de pH : 6.8-8.2, la composante principale du tampon de hepes est acide sulfurique éthylique de hydroxyethylpiperazine, HEPES est un tampon amphotère, qui est soluble dans l'eau et ne forme pas les complexes stables avec des ions en métal. Il a un bon pouvoir tampon dans la gamme de pH de 7.2-7.4. Il est en grande partie employé dans les kits diagnostiques biochimiques de kits, d'extraction de DNA/RNA et les kits diagnostiques d'ACP.
Utilisé dans un grand choix de réactions biochimiques :
1. Le tampon de HEPES est employé souvent comme réactif de tampon dans le milieu de culture cellulaire de divers types d'organismes, adhérence de cellule-cellule, agrégation et culture à court terme de cellules, et tampon pour les tissus et les cellules de nettoyage ;
2. Dans la recherche de protéine, les TUYAUX est employé souvent comme composant et éluant du tampon obligatoire en chromatographie d'échange cationique ;
3. Dans la recherche d'ADN, des TUYAUX est utilisés comme tampon pour le système de formation de phosphate de calcium et de précipité d'ADN, et comme tampon pour l'AFM et les expériences d'électroporation.
4. En outre, HEPES a une certaine interférence à la réaction entre l'ADN et les enzymes de restriction, et il n'est pas approprié que la méthode de Lowry détermine la teneur en protéines.
5. Le tampon de HEPES est employé souvent dans la recherche des organelles et les protéines et les enzymes fortement variables et sensibles au pH, aussi bien que les kits diagnostiques biochimiques, des kits de l'extraction de DNA/RNA et des kits diagnostiques d'ACP.
6. Le tampon de réaction, tampon de pré-hybridation, et tampon d'hybridation pour séparer et analyser les composants nucléaires d'ARN ; utilisé pour l'ARN et le T4RNA. La catégorie de biologie moléculaire est employée pour marquer le 3' - extrémité de l'ARN avec la ligase de l'ARN T4, pour séparer et analyser les composants du tampon de réaction, le tampon de pré-hybridation et le tampon d'hybridation de l'ARN nucléaire.
Questions connexes de HEPES
1. Le pH exigé pour la plupart des cellules est 7.2-7.4, mais le pH approprié pour la culture cellulaire varie avec les types de cellules étant cultivées. Les fibroblastes préfèrent un plus d'un pH élevé (7.4-7.7), alors que le passage des variétés de cellule transformées exige l'acidité. pH (7.0-7.4). Puisque la plupart des fluides de culture sont protégés par le système du bicarbonate de soude (NaHCO3) et du CO2, la concentration en CO2 dans la phase gaseuse devrait être dans l'équilibre avec la concentration en bicarbonate de soude dans le fluide de culture. Si la concentration en CO2 dans la phase gaseuse ou à l'air d'incubateur est placée à 5%, la quantité de NaHCO3 s'est ajoutée dans la solution de culture est 1.97g/L ; si la concentration en CO2 est maintenue à 10%, la quantité de NaHCO3 s'est ajoutée dans la solution de culture est 3.95g/L. La capsule de culture cellulaire ne devrait pas être vissée trop étroitement pour assurer l'échange de gaz ;
2. La valeur du pH de la solution de culture des paires utilisant de HCO3 et de CO2 tampon est instable et tend à être alcaline après stockage pendant une certaine période. Si le pH des changements liquides de culture trop rapidement, tampon de HEPES peut être ajouté au fluide de culture à une concentration finale de 10-25mM ;
3. HEPES est un tampon amphotère, en grande partie utilisé dans la recherche biologique telle que la phosphorylation oxydante, la synthèse de protéine dans un environnement stérile, la phosphorylation photosynthétique, la fixation de CO2, etc. ; HEPES n'exerce aucun effet sur les substrats de l'ionase en métal et convient à la transmission dans la microscopie électronique (TEM) ; dans des médias de culture cellulaire, l'avantage est qu'il peut maintenir une valeur du pH relativement constante pendant l'observation ouverte de culture ou de cellules. HEPES (25mM) peut être employé comme substitut pour la solution tampon de bicarbonate, ou comme addition de la solution tampon de bicarbonate (10-15mM) pour soulager la restriction de l'environnement de culture de CO2 de forte concentration. Le CO2 et le bicarbonate dissous sont également très importants pour la bonne croissance de cellules.
