Comment choisir le bon tampon de s, le HEPES et les tuyaux ?

Quand nous utilisons le bon tampon de s, nous confondons toujours par distraction le HEPES et les tuyaux dans le bon tampon de s, pensant qu'ils sont identiques, qui le rendent impossible de les distinguer très exactement. En fait, il y a des similitudes entre eux, mais il y a également beaucoup de différentes caractéristiques.

Particulièrement en cours de notre expérience, une petite différence peut mener à l'échec de l'expérience. Ainsi nous devons savoir quel tampon est et ce qu'il fait ? Afin de distinguer HEPES et tuyaux dans le tampon, quelle est la différence entre eux ? Utilisant quoi devrions-nous prêter l'attention à le moment où ?

La solution tampon est un genre de système spécial de tampon pour la recherche en matière des sciences de la vie. Dans des expériences biochimiques, la solution tampon joue un rôle indispensable. Elle peut résister à l'influence d'un peu d'acides et de bases forts, et maintient la valeur du pH la plus proche de l'environnement physiologique pour le système. HEPES et tampons de tuyaux sont utilisés généralement dans des expériences biologiques.

Image de paquet de tampon biologique de Desheng

La gamme de tampon de pH de HEPES est 6.8-8.2, qui est un genre de tampon biologique zwitterionic. Elle est soluble dans l'eau et ne forme pas les complexes stables avec des ions en métal. Dans la plupart des cas, elle n'interfère pas des processus biochimiques. Elle peut être très utilisée dans un grand choix de réactions biochimiques et être employée comme réactif de tampon dans quelques médias de culture cellulaire.

HEPES est utilisé généralement dans des médias de culture cellulaire de divers types d'organismes ; dans la recherche de protéine, il est employé souvent comme composant et éluant de tampon contraignant en chromatographie d'échange cationique ; dans la recherche d'ADN, il est employé comme tampon système de formation de phosphate de calcium et de sédiment d'ADN, AFM et expérience d'électroporation.

En outre, HEPES interfère la réaction entre l'ADN et l'enzyme de restriction et n'est pas approprié à la méthode de Lowry. Le tampon de HEPES est employé souvent dans la recherche des organelles et des protéines sensibles et des enzymes de pH, aussi bien que dans les kits diagnostiques biochimiques de kits, d'extraction d'ADN/ARN et les kits diagnostiques d'ACP. C'est un tampon d'ions d'hydrogène, qui peut commander la gamme constante de pH pendant longtemps. Quand la concentration finale est 10-50 le mmol/L et le milieu de culture contient 20 mmol/L HEPES, le pouvoir tampon peut être réalisé.

La gamme de tampon de pH des tuyaux est 6.1-7.5, insoluble dans l'eau et le soluble dans la solution de NaOH. Différent des tampons contenir des groupes aminés de BRI (2-hydroxyethyl) (tels que BRI Tris, bicine), tuyaux ne peut pas former les complexes stables avec la plupart des ions en métal, ainsi il convient aux tampons contenant des ions en métal.

Selon des études précédentes, des TUYAUX peuvent être employés pour épurer le tubulin à l'aide de la chromatographie de phosphate de cellulose, et pour épurer la protéine contraignante de recombinaison ARF1 et ARF2 de GTP par filtration au gel comme tampon pour cristalliser le ketoenzyme d'Escherichia coli. En outre, en raison de la formation des radicaux libres, tuyau n'est pas approprié au système redox. En chromatographie d'échange cationique, la basse concentration du tampon de tuyaux devrait être employée en raison de sa concentration ionique relativement élevée et valeur dépendant de la concentration de pKa.

Il peut voir que ni les tuyaux ni le HEPES ne peuvent former les complexes stables avec des ions en métal, qui convient à la solution contenant des ions en métal. Cependant, il y a quelques différences entre eux. En termes de solubilité, le tuyau est insoluble dans l'eau, alors que HEPES a la bonne solubilité dans l'eau. En termes de gamme de tampon, le tuyau est acide au neutre, et HEPES est neutre à alcalin. C'est principalement dû aux différences structurelles entre elles. Le tuyau a deux groupes sulfoniques, et HEPES contient un groupe sulfonique et groupe d'hydroxyle.

En outre, les tuyaux et les HEPES ont quelques limitations dans l'application de quelques systèmes. Par conséquent, quand nous choisissons les tampons ci-dessus, nous devons considérer l'aptitude du système expérimental et la différence de leurs propriétés.

Nous devrions apprendre à distinguer et comprendre les similitudes et les différences en ces réactifs, afin de favoriser mieux la R&D et la production de nos différents produits. Desheng adhère uniformément à ce genre de différence subtile, afin de sans interruption développer et fabriquer de meilleurs produits.